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专利号: 2019112308425
申请人: 安阳工学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.用于鉴别猪水泡病毒、口蹄疫病毒与塞尼卡谷病毒的三重荧光RT-PCR检测试剂盒,其特征在于:由A盒和B盒组成,A盒含有裂解液、1.5 mL Eppendorf管,B盒含有阳性对照、阴性对照、RT反应液和PCR反应液;所述PCR反应液中有3对引物和3个MGB探针,引物分别用于扩增猪水泡病毒VP1基因片段、口蹄疫病毒5’UTR基因片段和塞尼卡谷病毒3D基因片段,探针分别用于识别猪水泡病毒VP1基因、口蹄疫病毒5’UTR基因和塞尼卡谷病毒3D基因。

2.根据权利要求1所述的用于鉴别猪水泡病毒、口蹄疫病毒与塞尼卡谷病毒的三重荧光RT-PCR检测试剂盒,其特征在于:用于检测猪水泡病毒VP1基因的引物对及其探针序列如下:SVDV-F:5’-TGTCGATACCATTCATTG-3’SVDV-R:5’-CGTGTCTCATATATAGTGTC-3’SVDV-P:5’-FAM-CATCGGCAACGCATACAGCAT-BHQ1-MGB-3’其中FAM为荧光基团,BHQ-1为淬灭基团;

用于检测猪口蹄疫病毒5’UTR基因的引物对及其探针序列如下:FMDV-F:5’-CCGGTTAGTACTCTTAACAC-3’FMDV-R:5’-CGTAGAGCGTCGAACTAA-3’FMDV-P:5’-ROX-CTCCGCCTACTTGGTCGTCA-BHQ2-MGB-3’其中ROX为荧光基团,BHQ-2为淬灭基团;

用于检测猪塞尼卡谷病毒3D基因的引物对及其MGB探针序列如下:SVV-F:5’-CTGGTTGGTACGGATTAC-3’SVV-R:5’-GGCAGGAGTCATCTTATAC-3’SVV-P:5’-HEX-CGCCACCTCATTGAAGTCCAG-BHQ1-MGB-3’其中HEX为荧光基团,BHQ-1为淬灭基团。

3.根据权利要求1所述的用于鉴别猪水泡病毒、口蹄疫病毒与塞尼卡谷病毒的三重荧光RT-PCR检测试剂盒,其特征在于:A盒用于样本核酸的提取,室温保存;B盒用于RNA的逆转录和PCR扩增反应,-20℃保存。