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专利号: 2022101662507
申请人: 赣南师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种西番莲病毒的组合引物对,其特征在于:所述西番莲病毒包括东亚西番莲病毒、夜来香花叶病毒、西番莲潜隐病毒和柑橘弹状病毒;

所述东亚西番莲病毒的上游引物如:GAATGGTCACAACCCCAAC,下游引物如:TATCTAGGCATATACGGCTCT;

所述夜来香花叶病毒的上游引物如:GAATTGGATAGACAAGCCAT,下游引物如:CCACCTTTACGAATTCATTG;

所述柑橘弹状病毒的上游引物如:ATATTCACCCCGATAACCAAGG,下游引物如:GACACCCTGATAGAATCGAG;

所述西番莲潜隐病毒的上游引物如:ATGCAAACAATGGGTAAGCA,下游引物如:TCGTTAAATTGCGAATACGG。

2.一种西番莲病毒的多重RT‑PCR检测方法:其特征在于:其包括如下步骤:(1)、提取待检西番莲植物的总RNA;

(2)、在多重RT‑PCR反应体系中,加入如权利要求1所述的组合引物对、缓冲液、双蒸水、酶和RNA模板,然后设定反应程序;

(3)、反应完成后,取出反应物,与上样缓冲液混合均匀,点入琼脂糖凝胶孔中电泳,在凝胶成像仪上观察结果。

3.根据权利要求2所述的西番莲病毒的多重RT‑PCR检测方法:其特征在于:步骤(1)中,所述西番莲病毒包括东亚西番莲病毒、夜来香花叶病毒、西番莲潜隐病毒和柑橘弹状病毒。

4.根据权利要求2所述的西番莲病毒的多重RT‑PCR检测方法:其特征在于:步骤(2)中,所述组合引物对包括东亚西番莲病毒的上游引物如:GAATGGTCACAACCCCAAC,下游引物如:TATCTAGGCATATACGGCTCT;

夜来香花叶病毒的上游引物如:GAATTGGATAGACAAGCCAT,下游引物如:CCACCTTTACGAATTCATTG;

柑橘弹状病毒的上游引物如:ATATTCACCCCGATAACCAAGG,下游引物如:GACACCCTGATAGAATCGAG;

西番莲潜隐病毒的上游引物如:ATGCAAACAATGGGTAAGCA,下游引物如:TCGTTAAATTGCGAATACGG。

5.根据权利要求2所述的西番莲病毒的多重RT‑PCR检测方法:其特征在于:步骤(2)中,所述反应程序为:50℃,孵育30 min,94℃预变性4 min,94℃变性20 s,56℃退火20 s,72℃延伸1 min,35个循环,72℃再延伸7 min。