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专利号: 2013104710217
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种普鲁兰酶突变体,其特征在于有一个相对于脱支芽孢杆菌普鲁兰酶活性氨基酸残基的取代,所述氨基酸与普鲁兰酶的热稳定性相关;其特征是将NCBI数据库中登录号为AX203845的普鲁兰酶的第503位的天冬氨酸分别突变成精氨酸、苯丙氨酸、色氨酸或酪氨酸,分别命名为D503R、D503F、D503W及D503Y。

2.权利要求1所述的突变体的制备方法,包括如下步骤:

1)在脱支芽孢杆菌普鲁兰酶氨基酸序列的基础上确定突变位点;设计定点突变的突变引物,以携带普鲁兰酶基因的载体为模板进行定点突变并构建含突变体的质粒载体;

2)将突变质粒转化进宿主细胞;

3)挑选阳性克隆进行发酵培养,并纯化普鲁兰酶突变体;

所述质粒载体为pUC系列,pET系列,或pGEX中的任意一种;所述宿主细胞为细菌或真菌细胞;所述细菌为革兰氏阴性细菌或革兰氏阳性细菌。