1.一种耐热型中性普鲁兰酶的突变体,其特征在于,所述突变体是以氨基酸序列如SEQ ID NO .1所示的普鲁兰酶为出发序列,进行以下(a)(d)中的任意一种改进:~
(a)将SEQ ID NO .1所示氨基酸序列中的第73位苏氨酸突变为溴乙基酪氨酸,以及第
171位异亮氨酸突变为半胱氨酸;
(b)将SEQ ID NO .1所示氨基酸序列中的第135位脯氨酸突变为溴乙基酪氨酸,以及第
314位丙氨酸突变为半胱氨酸;
(c)将SEQ ID NO .1所示氨基酸序列中的第73位苏氨酸突变为溴乙基酪氨酸,以及第
171位异亮氨酸突变为半胱氨酸;以及第126位的苏氨酸突变为苯丙氨酸;
(d)将SEQ ID NO .1所示氨基酸序列中的第73位苏氨酸突变为溴乙基酪氨酸,以及第
171位异亮氨酸突变为半胱氨酸;以及第126位的苏氨酸突变为苯丙氨酸;以及第72位丙氨酸突变为精氨酸。
2.根据权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述突变体的氨基酸序列的N端融合信号肽PelB。
3.编码权利要求1‑2任意一项所述突变体的基因。
4.一种重组载体,其特征在于,所述重组载体携带权利要求3所述的基因。
5.根据权利要求4所述的重组载体,其特征在于,所述重组载体的出发载体为pET系列、Duet系列、pGEX系列、pHY300、pHY300PLK、pPIC3K或pPIC9K系列中的任意一种。
6.一种重组微生物细胞,其特征在于,携带权利要求3所述的基因或者表达权利要求1‑
2任一所述的突变体。
7.根据权利要求6所述的重组微生物细胞,其特征在于,所述微生物细胞为原核生物或者真核生物。
8.权利要求1‑2任意一项所述的突变体、权利要求3所述的基因、权利要求4或5所述的重组载体在水解淀粉中的应用。
9.一种提高分解淀粉效率的方法,其特征在于,所述方法是利用权利要求1‑2任意一项所述的突变体加入到糊化后淀粉水溶液中,在60℃‑65℃条件下水解。