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专利号: 2021105271283
申请人: 宿迁市江南大学产业技术研究院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种耐热型中性普鲁兰酶的突变体,其特征在于,所述突变体是以氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的普鲁兰酶为出发序列,对第72、73、126、135、314位中的至少一个氨基酸突变获得的。

2.根据权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述突变体为以下(a)~(d)中的任意一种:

(a)将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中的第73位苏氨酸突变为溴乙基酪氨酸;

(b)将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中的第135位脯氨酸突变为溴乙基酪氨酸,以及第

314位丙氨酸突变为半胱氨酸;

(c)将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中的第135位脯氨酸突变为溴乙基酪氨酸,第314位丙氨酸突变为半胱氨酸,以及第126位的苏氨酸突变为苯丙氨酸;

(d)将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中的亲本的第135位脯氨酸突变为溴乙基酪氨酸,第314位丙氨酸突变为半胱氨酸,第126位的苏氨酸突变为苯丙氨酸,以及第72位丙氨酸突变为精氨酸。

3.根据权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述突变体的氨基酸序列的N端融合信号肽PelB。

4.编码权利要求1‑3任意一项所述突变体的基因。

5.一种重组载体,其特征在于,所述重组载体携带权利要求4所述的编码基因。

6.根据权利要求5所述的重组载体,其特征在于,所述重组载体的出发载体为pET系列、Duet系列、pGEX系列、pHY300、pHY300PLK、pPIC3K或pPIC9K系列中的任意一种。

7.一种重组微生物细胞,其特征在于,携带权利要求4所述的基因或者表达权利要求1‑

3任一所述的突变体。

8.根据权利要求7所述的重组微生物细胞,其特征在于,所述微生物细胞为原核生物或者真核生物。

9.权利要求1‑3任意一项所述的突变体、权利要求4所述的编码基因、权利要求5或6所述的重组载体在水解淀粉中的应用。

10.一种提高分解淀粉效率的方法,其特征在于,所述方法是利用权利要求1‑3任意一项所述的突变体加入到糊化后淀粉水溶液中,在60℃‑65℃条件下水解。