1.一种重组R-ω-转氨酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示。
2.一种R-ω-转氨酶突变体,由序列如SEQ ID NO.15所示氨基酸经定点突变而来,所述突变的位点为下列中的一个或多个:(1)第71位、(2)第135位、(3)第292位。
3.如权利要求2所述的R-ω-转氨酶突变体,其特征在于所述R-ω-转氨酶突变体由序列如SEQ ID NO.15所示氨基酸经下列之一或多个位点突变而得:(1)第71位组氨酸突变为赖氨酸、苏氨酸、丙氨酸或精氨酸;(2)第135位缬氨酸突变为苏氨酸、甘氨酸、亮氨酸、丙氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸或谷氨酸;(3)第292位甘氨酸变为丙氨酸、精氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸或组氨酸。
4.如权利要求3所述的R-ω-转氨酶突变体,其特征在于所述R-ω-转氨酶突变体由序列如SEQ ID NO.1所示氨基酸经下列之一或多个位点突变而得:(1)第71位组氨酸突变为苏氨酸;(2)第135位缬氨酸突变为亮氨酸;(3)第292位甘氨酸变为精氨酸。
5.如权利要求4所述的R-ω-转氨酶突变体,其特征在于所述R-ω-转氨酶突变体序列如SEQ ID NO.17所示。
6.权利要求1~5之一所述的R-ω-转氨酶及其突变体在催化西他列汀前体酮不对称合成西他列汀中的应用。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述应用为:以含所述R-ω-转氨酶或突变体编码基因的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体或湿菌体经超声破碎后获得的上清液作为催化剂,以西他列汀前体酮为底物,以磷酸吡哆醛为辅酶,以异丙胺为氨基供体,在pH8.0~9.0的三乙醇胺-HCl缓冲液中,20~60℃、300~500r/min条件下反应,反应结束后,反应液分离纯化,获得西他列汀。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于所述R-ω-转氨酶或突变体编码基因序列如SEQ ID NO.16或SEQ ID NO.18所示。