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专利号: 2018114846822
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种甲壳素酶突变体,其特征在于,含有如SEQ ID NO.2-6所示的氨基酸序列。

2.编码权利要求1所述的甲壳素酶突变体的基因。

3.含有权利要求2所述基因的载体。

4.表达权利要求1所述甲壳素酶突变体的细胞。

5.一种基因工程菌,其特征在于,是以枯草芽孢杆菌为宿主,表达权利要求1所述的甲壳素酶突变体。

6.如权利要求5所述的基因工程菌,其特征在于,是以Bacillus.subtilis WB600为宿主,以pP43NMK为表达载体。

7.一种提高甲壳素酶酶活的方法,其特征在于,将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的甲壳素酶第43位的半胱氨酸突变为天冬氨酸;

或,将第273位的苯丙氨酸突变为色氨酸;

或,将第336位的谷氨酸突变为精氨酸;

或,将第43位的半胱氨酸突变为天冬氨酸,并将第273位的苯丙氨酸突变为色氨酸;

或,将第43位的半胱氨酸突变为天冬氨酸,并将第273位的苯丙氨酸突变为色氨酸,并将第336位的谷氨酸突变为精氨酸。

8.权利要求5或6所述基因工程菌在发酵领域的应用。

9.一种生产权利要求1所述甲壳素酶突变体的方法,其特征在于,将权利要求5或6所述的基因工程菌接种到LB液体培养基中,35-40℃培养7-10h后,转接到TB培养基中,接种量为

2-5%,35-40℃培养12-14h。

10.权利要求1所述的甲壳素酶突变体在农业、生物、化妆品、食品或卫生领域的应用。