1.一种水产品中甘氨酸甜菜碱的检测方法,其特征在于包括以下步骤:
1)制备至少6种不同浓度的标准溶液并进行液相色谱法检测,测定不同浓度的标准溶液对应的色谱峰面积值,得到标准色谱图;
2)根据步骤1)获得的标准色谱图制作成甘氨酸甜菜碱浓度与色谱峰面积的关系曲线图;
3)对待检测的水产品样品进行预处理得到待测样液;
4)使用高效液相色谱仪对步骤3)得到的待测样液进行检测,测得待测样液的色谱峰面积,
5)根据步骤2)得到的甘氨酸甜菜碱浓度与色谱峰面积的关系曲线图,计算得到待检测的水产品样品的甘氨酸甜菜碱含量;
所述的步骤3)中预处理具体包括:在待检测的水产品样品中加入有机溶剂,室温下涡旋振荡30min后,3500~4500r/min离心5~8min,过滤取上清液,重复上述步骤提取三次后,合并上清液,将合并后的上清液过
0.22μm滤膜得到待测样液;所述的步骤3)中加入的有机溶剂为95%甲醇,具体操作为:准确称取0.5g待检测的水产品样品于50mL离心管中,往离心管中加入10mL95%甲醇;
所述的步骤4)中色谱条件具体为:a) 色谱柱:粒径为2.5μm,规格为4.6×150mm的BEH HILIC色谱柱;
b) 柱温:20~25℃;
c) 流动相:水∶乙腈的体积比为20∶80的混合溶液,等度洗脱;
d) 流动相流速:0.6~1.0mL/min;
e) 进样体积:5~10μL;
f)检测器类型:荧光检测器;
g)检测波长:195nm;
所述的待检测的水产品样品为新鲜水产品样品或者冷冻水产品样品;所述水产品为蟹或虾。
2.根据权利要求1所述的水产品中甘氨酸甜菜碱的检测方法,其特征在于所述的步骤
1)的具体内容为:
称取甘氨酸甜菜碱标准品并用乙腈溶液逐级稀释,分别稀释成至少6种不同浓度的标准溶液,将不同浓度的标准溶液分别用高效液相色谱仪进行检测并得到对应浓度的标准色谱图,测定相应的色谱峰面积值。
3.根据权利要求1或2所述的水产品中甘氨酸甜菜碱的检测方法,其特征在于所述的步骤2)的具体内容为:
根据步骤1)获得的标准色谱图,以标准溶液中甘氨酸甜菜碱的质量浓度为横坐标,以色谱峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得到甘氨酸甜菜碱浓度与色谱峰面积的关系曲线图,即甘氨酸甜菜碱浓度与色谱峰面积的对应函数关系。