1.一种检测人体疲劳状态的方法，其特征在于：先用疲劳状态检测试纸检测高浓度的唾液待测液，如果疲劳状态检测试纸显示为重度疲劳，再在疲劳状态检测试纸上用低浓度的唾液待测液检测重度疲劳级别。

2.根据权利要求1所述的一种检测人体疲劳状态的方法，其特征在于具体包括如下步骤：

A.将收集到的人体唾液与磷酸缓冲液混合,配制成高浓度的唾液待测液和低浓度的唾液待测液；

B.将高浓度的唾液待测液加至疲劳状态检测试纸上，静置5～15分钟；

C.当疲劳状态检测试纸上只显示质控线（7）时，为轻度疲劳；当同时显示检测线（6）和质控线（7）时，为重度疲劳；当质控线（7）未显示时，为无效结果；

D.当步骤C同时显示检测线和质控线时，将低浓度的唾液待测液加至疲劳状态检测试纸上，如果只显示质控线，则为重度疲劳Ⅰ级，如果同时显示检测线和质控线，则为重度疲劳Ⅱ级，当质控线未显示时，为无效结果。

3.根据权利要求2所述的一种检测人体疲劳状态的方法，其特征在于人体唾液的收集过程为：使受试人先用生理盐水漱口三次，再用清水漱口三次，然后做咀嚼运动或舌尖上翘，使唾液在下颌部聚集，通过下唇收缩，使唾液顺着下唇形成的通道流入唾液收集管中，唾液收集量为0.5～3mL。

4.根据权利要求2所述的一种检测人体疲劳状态的方法，其特征在于：高浓度的唾液待测液为人体唾液与磷酸缓冲液按体积比2:1混合，高浓度的唾液待测液浓度是低浓度的唾液待测液浓度的1.5～3倍，所述磷酸缓冲液中含10～20mmol/L的磷酸氢二钠、1～5mmol/L的磷酸二氢钾和0.1～0.2mol/L的氯化钠，磷酸缓冲液的pH值为7.0～8.0。

5.根据权利要求1～4任一项所述的一种检测人体疲劳状态的方法，其特征在于：疲劳状态检测试纸包括底板（1）、样品垫（2）、金标垫（3）、反应垫（4）和吸样垫（5），金标垫（3）上含有核连蛋白2单克隆抗体标记的免疫胶体金，反应垫上有检测线（6）和质控线（7），检测线（6）上含有核连蛋白2单克隆抗体，质控线（7）上含有羊抗鼠IgG多克隆抗体。

6.根据权利要求5所述的一种检测人体疲劳状态的方法，其特征在于核连蛋白2单克隆抗体标记的免疫胶体金溶液的制备方法为：在搅拌状态下，向胶体金溶液中缓慢加入核连蛋白2单克隆抗体溶液，核连蛋白2单克隆抗体与胶体金溶液的质量体积比为10～25μg/ml，静置15～30分钟后离心，将沉淀物用复溶液复溶，复溶液的体积是胶体金溶液体积的0.3～

0.5倍。

7.根据权利要求6所述的一种检测人体疲劳状态的方法，其特征在于胶体金溶液的制备方法包括如下步骤：a.将浓度为8～10mmol/L的氯金酸溶液搅拌状态下加热，沸腾10～15分钟后，迅速加入

5～6mol/L的柠檬酸三钠溶液并搅拌，柠檬酸三钠溶液与氯金酸溶液的体积比为1:45～50，再次沸腾后，超声处理5～8分钟；

b.将a步骤所得溶液再次加热至沸腾后，在搅拌状态下缓慢加入与a步骤中相同体积和浓度的氯金酸溶液和柠檬酸三钠溶液，至溶液颜色变成深红色后停止加热，4℃条件下避光保存。

8.根据权利要求6所述的一种检测人体疲劳状态的方法，其特征在于：复溶液中含有

0.1～0.3mol/L的Tris、10～25g/L的BSA、4～8g/L的海藻糖、5～10g/L的蔗糖、2～5g/L的Tween-20、5～10g/L的聚乙二醇20000、3～8g/L的氯化钠和0.2～0.5g/L的叠氮钠，pH值为7 .0～8.0。

9.根据权利要求5所述的一种检测人体疲劳状态的方法，其特征在于：检测线（6）是将核连蛋白2单克隆抗体用划膜液稀释至2～3mg/mL后喷涂干燥得到，质控线（7）是将羊抗鼠IgG多克隆抗体用划膜液稀释至1.5～2.0mg/mL后喷涂干燥得到；

所述划膜液中含有10～15g/L的蔗糖、0.2～0.3mol/L的Tris、2～2.5g/L的BSA、1.5～

2.0g/L的聚乙二醇20000、0.2～0.5g/L的叠氮钠, 划膜液的pH值为7.0～8.0。

10.根据权利要求5所述的一种检测人体疲劳状态的方法，其特征在于：样品垫是由预处理液浸泡后干燥得到，所述预处理液含有1～5g/L的曲拉通X-100、3.5～5.0g/L的海藻酸钠、2.5～4.5g/L的氯化钾、5～8g/L的抗坏血酸、1.5～2.0g/L的α淀粉酶、1.0～1.5g/L的β环糊精、0.3～1.0g/L的聚乙烯吡咯烷酮、0.2～0.3mol/L的Tris，预处理液的pH值为8.0～

8.5。