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专利号: 2016107567801
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法,其特征在于:包括,

对动植物油中甘三酯进行层析分离并收集甘油三酯;

将其用脂肪酶水解后,对水解产物经薄层层析分离,确定α游离脂肪酸并收集进行衍生化处理;

进气相色谱检测,测定甘油三酯中α位脂肪酸的组成及含量。

2.根据权利要求1所述动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法,其特征在于:所述层析分离,其是采用硅胶柱层析分离,其中,柱层析洗脱液为石油醚和乙醚,其体积比为80~

90:10~15,洗脱速度为1~3ml/min。

3.根据权利要求1或2所述动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法,其特征在于:所述脂肪酶水解,其是加入脂肪酶、胆酸钠、CaCl2,在37~55℃下,保持15~25min,然后在3000~5000r/min的条件下,离心5min。

4.根据权利要求1或2所述动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法,其特征在于:所述脂肪酶为米根霉发酵生产的α特异性脂肪酶,其添加量为甘油三酯质量的5~15%。

5.根据权利要求3所述动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法,其特征在于:所述脂肪酶水解,还加入MgCl2,且满足添加后Mg2+在混合液中的浓度为3~4mmol/L。

6.根据权利要求1、2或5任一所述动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法,其特征在于:所述薄层层析分离,其是将硅胶G板置于105℃烘箱中活化1h,然后用0.4mol/L硼酸溶液饱和处理,自然通风晾干后进行展开,在薄板上均匀喷洒0.2wt%的2,7-二氯荧光素的甲醇溶液并在紫外灯下显色处理,油酸作为参照标样,确定α-游离脂肪酸在高效薄层色谱上的位置,将α-游离脂肪酸条带刮下,用乙醚提取。

7.根据权利要求6所述动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法,其特征在于:所述进行展开,其中,使用的扩展液为己烷、乙醚、乙酸按体积比为70~80:20~30:0.5~1的混合液,处理时间为40~50min。

8.根据权利要求1、2、5或7任一所述动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法,其特征在于:所述衍生化处理,其是使用氮吹仪将溶剂挥发掉,并向离心管中加入1~2mL正己烷和

0.5~1mL 1~1.5mol/L的氢氧化钠-甲醇溶液,将混合液涡旋混匀1min,4000~5000r/min离心3~5min,收集上清液。

9.根据权利要求1、2、5或7任一所述动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法,其特征在于:所述进气相色谱检测,其是吸取上清液于进样瓶中,采用气相色谱-氢火焰离子检测,载气为纯度大于99.99%的氮气,载气流速为1.0mL/min,分流比为100~50∶1,气化室温度

250~300℃,FID检测器温度为250~300℃,进样体积1.0μL,气相色谱柱规格为SP-2560、

100m×0.25mm、0.20μm毛细管柱。

10.根据权利要求9所述动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法,其特征在于:所述气相色谱-氢火焰离子检测分析条件为程序升温,其初始温度为80~100℃,保持2~5min,以5~15℃/min升至160~200℃,保持2~5min,再以5~15℃/min升温至210~230℃。