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专利号: 2021114897559
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种大肠杆菌工程菌,其特征在于,所述大肠杆菌工程菌同时过表达了氢化酶镍掺入蛋白HypB和氢化酶表达/形成蛋白HypC。

2.如权利要求1所述的大肠杆菌工程菌,其特征在于,所述氢化酶镍掺入蛋白HypB的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示,所述氢化酶表达/形成蛋白HypC的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示。

3.如权利要求1或2所述的大肠杆菌工程菌,其特征在于,所述大肠杆菌工程菌以大肠杆菌E.coli K12 MG1655为表达宿主,或以敲除了E.coli K12 MG1655基因组中的pflB,adhE和frdA基因的工程菌株为表达宿主。

4.如权利要求1~3任一所述的大肠杆菌工程菌,其特征在于,以pTrc99a为表达载体。

5.一种组合蛋白在提高大肠杆菌的乳酸胁迫抗性中的应用,其特征在于,所述应用为,在大肠杆菌中过表达所述组合蛋白,所述组合蛋白为氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示的氢化酶镍掺入蛋白HypB和氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示的氢化酶表达/形成蛋白HypC。

6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,所述大肠杆菌为大肠杆菌E.coli K12 MG1655或敲除了E.coli K12 MG1655基因组中的pflB,adhE和frdA基因的工程菌株。

7.一种乳酸的制备方法,其特征在于,所述方法为,采用重组大肠杆菌发酵制备得到,所述重组大肠杆菌为:以敲除了E.coli K12 MG1655基因组中的pflB,adhE和frdA基因的工程菌株为表达宿主,同时过表达了氢化酶镍掺入蛋白HypB和氢化酶表达/形成蛋白HypC;所述氢化酶镍掺入蛋白HypB的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示,所述氢化酶表达/形成蛋白HypC的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示。

8.权利要求1~4任一所述的大肠杆菌工程菌在发酵生产代谢产物中的应用,其特征在于,所述代谢产物是参与有机酸代谢的物质。

9.一种抗酸胁迫元器件,其特征在于,包括氨基酸序列如SEQ ID NO.9的氢化酶镍掺入蛋白HypB和氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示氢化酶表达/形成蛋白HypC。

10.权利要求9所述的抗酸胁迫元器件在提高大肠杆菌制备乳酸产量中的应用,其特征在于,所述大肠杆菌为以敲除了E.coli K12 MG1655基因组中的pflB,adhE和frdA基因的工程菌株。