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专利号: 2021109612592
申请人: 浙江海洋大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 医学或兽医学;卫生学
更新日期:2025-04-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种制备鳗鱼鱼鳔胶原蛋白‑壳聚糖‑复合海藻酸钠水凝胶的方法,其特征在于包括如下步骤:

1)预处理:将新鲜鳗鱼鱼鳔清洗干净,除去鱼鳔上覆盖的非鱼鳔组织,血管,脂肪以及表层的膜,去离子水清洗干净后剪成0.5×0.5cm小块,用氢氧化钠溶液在20℃左右条件下浸泡并搅拌48小时,以除去鱼鳔中的杂蛋白,每6h更换氢氧化钠溶液1次,然后将鱼鳔用蒸馏水清洗直至鱼鳔呈现中性;再将鱼鳔放入正丁醇溶液中,同样在20℃左右条件下浸泡并搅拌48小时,以除去鱼鳔中的脂质,每6h更换正丁醇溶液1次,再用蒸馏水将鱼鳔中的正丁醇清洗干净;将清洗好的鳗鱼鱼鳔置于‑20℃保存,备用;

2)取经过预处理后的鳗鱼鱼鳔,放入乙酸溶液中,在24℃恒温摇床上进行酸解处理

21h;取纱布过滤未酸解完全的鱼鳔,取滤液;将滤液装入透析袋置于纯水中透析3天,每天更换透析液2次,透析过程中对透析液温和搅拌,直到透析液pH显中性;然后对透析过的胶原蛋白进行冷冻干燥处理,即得酸溶性胶原蛋白,置于‑20℃冰箱储存备用;

3)取步骤2制备得到的胶原蛋白,卡波姆,海藻酸钠;胶原蛋白用0.50mol/L的乙酸溶液超声溶解均匀,置于纯化水中透析至中性,取出胶原蛋白为原料液1;卡波姆加入纯化水和甘油,于60℃水浴锅中溶胀40min,再用0.01mol/L的NaOH溶液调节其PH为6.5‑7,充分搅拌得原料液2;海藻酸钠加入纯化水充分溶胀,搅拌均匀得原料液3;将原料液1、2、3全部混合,充分搅拌均匀,放入4℃冰箱脱泡2h,由于溶胀使得凝胶液体积增大,共制得200ml凝胶液;

4)交联液制备:制备CaCl2溶液和壳聚糖溶液,将两种溶液混合均匀,即得交联液,密封保存备用;

5)CCA水凝胶交联:将步骤3)制备得到的凝胶液倒入培养皿中,平铺均匀薄薄一层即可,放入4℃冰箱冷存2h后取出,将交联剂溶液倒入上述培养皿中,使之充分交联后,即得鱼鳔胶原蛋白‑壳聚糖‑复合海藻酸钠水凝胶,取出水凝胶片,用蒸馏水冲洗干净后,备用;

所述步骤2)中乙酸溶液的浓度为0.42mol/L;

所述步骤2)中乙酸溶液与预处理后的鳗鱼鱼鳔的液料比为58ml/g。

2.根据权利要求1所述一种制备鳗鱼鱼鳔胶原蛋白‑壳聚糖‑复合海藻酸钠水凝胶的方法,其特征在于所述步骤1)中氢氧化钠溶液的浓度为0.1mol/L。

3.根据权利要求1所述一种制备鳗鱼鱼鳔胶原蛋白‑壳聚糖‑复合海藻酸钠水凝胶的方法,其特征在于所述步骤1)中正丁醇溶液的浓度为10%,单位g/ml。

4.根据权利要求1所述一种制备鳗鱼鱼鳔胶原蛋白‑壳聚糖‑复合海藻酸钠水凝胶的方法,其特征在于所述步骤3)中胶原蛋白与卡波姆的重量比为4:3;所述胶原蛋白与海藻酸钠的重量比为1:3;所述胶原蛋白与甘油的重量比为1:1;所述海藻酸钠与蒸馏水的重量体积比g/ml为1:50。

5.根据权利要求1所述一种制备鳗鱼鱼鳔胶原蛋白‑壳聚糖‑复合海藻酸钠水凝胶的方法,其特征在于所述步骤3)中原料液1的配制中胶原蛋白与乙酸溶液的重量体积比g/ml为

1:65;所述原料液2的配制中卡波姆与纯化水的重量体积比g/ml为1:40,所述原料液2的配制中甘油与纯化水的重量体积比g/ml为1:30,所述原料液3的配制中,海藻酸钠与纯化水的重量体积比g/ml为3:55。

6.根据权利要求1所述一种制备鳗鱼鱼鳔胶原蛋白‑壳聚糖‑复合海藻酸钠水凝胶的方法,其特征在于所述步骤4)中CaCl2溶液的浓度为0.01g/ml,壳聚糖溶液的浓度为0.0075g/ml。

7.根据权利要求1所述一种制备鳗鱼鱼鳔胶原蛋白‑壳聚糖‑复合海藻酸钠水凝胶的方法,其特征在于所述步骤4)中CaCl2溶液与壳聚糖溶液的体积比为1:1。

8.根据权利要求1所述一种制备鳗鱼鱼鳔胶原蛋白‑壳聚糖‑复合海藻酸钠水凝胶的方法,其特征在于所述步骤5)中凝胶液与交联剂溶液的体积比1:1。