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专利号: 2020109612920
申请人: 青岛科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种利用胆红素氧化酶放大检测信号的阴极光电化学免疫传感器,其特征在于,所述阴极光电化学免疫传感器是以P型半导体材料作为光电化学基底,将胆红素氧化酶作为信号放大元件,标记于信号抗体,通过捕获抗体探针、目标抗原和信号抗体之间的夹心免疫反应,实现阴极光电流检测信号的显著放大和对目标抗原的灵敏检测;其中将胆红素氧化酶信号放大元件负载于碳纳米管上,可提高所述胆红素氧化酶的负载量和催化氧还原反应效率。

2.一种如权利要求1所述的利用胆红素氧化酶放大检测信号的阴极光电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,具体步骤包括:

(1)制备CdSe/NiO光阴极:以宽带隙P型半导体NiO作为阴极光电化学基底,在所述基底表面修饰窄带隙敏化剂CdSe量子点QDs,制备CdSe/NiO异质结光阴极;

(2)制备免疫传感电极:用前列腺特异抗原PSA对应的捕获抗体Ab1修饰步骤(1)制备的CdSe/NiO光阴极,并用牛血清白蛋白封闭电极活性位点,室温孵育,得到免疫传感电极;

(3)制备Ab2-BOD/CNT:将胆红素氧化酶BOD和前列腺特异抗原PSA对应的信号抗体Ab2一起负载于碳纳米管CNT上,制备BOD/CNT标记的Ab2;

(4)将所述免疫传感电极在室温下孵育目标Ag,以使Ab1与Ag发生特异性免疫反应;随后所述免疫传感电极在室温下继续孵育所述Ab2-BOD/CNT,使得Ag与Ab2发生特异性免疫反应,以使在所述免疫传感电极上引入BOD/CNT复合物,即得所述阴极光电化学免疫传感器。

3.根据权利要求2所述的一种利用胆红素氧化酶放大检测信号的阴极光电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,将氧化铟锡电极插入盛有C6H12N4和Ni(NO3)2混合液的反应釜中,加热、煅烧,得到NiO修饰电极;配制CdSe QDs溶液,并将所述NiO修饰电极分别在聚二甲基二烯丙基氯化铵PDDA溶液和CdSe QDs溶液中浸泡,最终得到CdSe/NiO光阴极。

4.根据权利要求3所述的一种利用胆红素氧化酶放大检测信号的阴极光电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述混合液中C6H12N4和Ni(NO3)2的摩尔比为1:1;所述CdSe QDs溶液的配制过程为:在CdCl2水溶液中加入巯基乙酸,调节pH至10.0,通N2除氧并加入NaHSe溶液,回流制得。

5.根据权利要求2所述的一种利用胆红素氧化酶放大检测信号的阴极光电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,在活化后的CdSe/NiO光阴极上滴加Ab1,低温孵育,随后用磷酸盐缓冲液冲洗干净后,滴加牛血清白蛋白溶液,室温孵育以封闭电极活性位点,最终得到免疫传感电极。

6.根据权利要求5所述的一种利用胆红素氧化酶放大检测信号的阴极光电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述Ab1低温孵育的浓度为100~250μg/mL。

7.根据权利要求2所述的一种利用胆红素氧化酶放大检测信号的阴极光电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中,在CNT分散液中加入EDC/NHS溶液,室温活化,随后将BOD和Ab2混合加入到活化后的CNT溶液中,低温孵育,得到BOD/CNT标记的Ab2,即Ab2-BOD/CNT。

8.根据权利要求2所述的一种利用胆红素氧化酶放大检测信号的阴极光电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述步骤(4)中,所述免疫传感电极上滴加目标Ag室温孵育后,在所述免疫传感电极上继续滴加所述Ab2-BOD/CNT室温孵育1~2h,以最终在免疫传感电极上引入BOD/CNT复合物。

9.一种如权利要求1所述的利用胆红素氧化酶放大检测信号的阴极光电化学免疫传感器或如权利要求2~8任一所述方法制备的阴极光电化学免疫传感器在体外诊断产品中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述阴极光电化学免疫传感器的测试环境为pH 6.5~7.5的缓冲溶液,并以溶解氧作为电子受体。