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专利号: 2020107984793
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种麦芽寡糖基海藻糖水解酶突变体,其特征在于,所述突变体是通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的麦芽寡糖基海藻糖水解酶的第

137位氨基酸由亮氨酸突变为甲硫氨 酸得到的;

或所述突变体是通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的麦芽寡糖基海藻糖水解酶的第216位氨基酸由丙氨酸突变成苏氨酸得到的。

2.编码权利要求1所述突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的重组质粒。

4.如权利要求3所述的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒的载体为pUC质粒载体、pET质粒载体或pGEX质粒载体。

5.携带权利要求2所述基因,或权利要求3或4所述重组质粒的工程化细胞。

6.如权利要求5所述的工程化细胞,其特征在于,其宿主细胞为细菌或真菌。

7.制备权利要求1所述突变体的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)根据确定的突变位点,设计定点突变的突变引物,以携带麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因的载体为模板进行定点突变;构建含有编码突变体的基因的质粒载体;

(2)将突变体质粒转化进宿主细胞;

(3)挑选阳性克隆工程化细胞进行发酵培养,发酵结束后,将发酵获得的发酵液进行离心,收集细胞,细胞破壁上清液即为突变体麦芽寡糖基海藻糖水解酶的粗酶液。

8.权利要求1所述麦芽寡糖基海藻糖水解酶突变体,或权利要求2所述基因,或权利要求3或4所述重组质粒,或权利要求5或6所述工程化细胞,或权利要求7所述制备方法在生产海藻糖中的应用。

9.一种生产海藻糖的方法,其特征在于,使用权利要求1所述的麦芽寡糖基海藻糖水解酶突变体。