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专利号: 2017107911396
申请人: 泗县飞虹体育文化发展有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-04-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种金纳米粒子-石墨烯量子点手性二聚体的制备方法,其特征在于包括18nm金纳米粒子的合成,5nm石墨烯量子点的合成,金纳米粒子和石墨烯量子点分别修饰互补的DNA分子,金纳米粒子和石墨烯量子点形成二聚体结构,二聚体的透射电子显微镜表征和手性信号的测定。

2.根据权利要求1所述的一种金纳米粒子-石墨烯量子点手性二聚体的制备方法,其特征在于所述的18nm金纳米粒子的合成步骤为:首先将200mL的锥形瓶用王水浸泡过夜,然后用超纯水清洗干净,加入95.5mL超纯水于锥形瓶中,再加入2.5mL质量浓度为0.4%的氯金酸溶液,将其置于加热磁力搅拌器上加热至沸腾,持续沸腾15min后,再在加热搅拌的状态下迅速加入2mL质量浓度为1%的柠檬酸三钠溶液,待溶液由无色变为酒红色后持续加热5min,停止加热后继续搅拌至溶液冷却至室温。

3.根据权利要求1所述的一种金纳米粒子-石墨烯量子点手性二聚体的制备方法,其特征在于所述的5nm石墨烯量子点的合成步骤为:将氧化石墨烯在氮气保护的作用下300℃加热3h,从而得到热还原的石墨烯片,称取80mg石墨烯片加入到含有10mL浓H2SO4和30mL浓HNO3的混合酸溶液中过夜超声,加入500mL的蒸馏水稀释,用0.22μm的微孔滤膜过滤除去酸溶液,再用蒸馏水清洗3次,最后将滤饼用50mL超纯水重悬,并用NaOH溶液调节pH至8.0,将其置于高压反应釜中,200℃的条件下加热反应12h,冷却至室温后,将溶液再次用0.22μm的微孔滤膜过滤除去大块的石墨烯片,收集滤液,将滤液避光条件下透析3次,从而得到石墨烯量子点溶液。

4.根据权利要求2所述的一种金纳米粒子-石墨烯量子点手性二聚体的制备方法,其特征在于所述的金纳米粒子修饰DNA1的步骤为:将新合成的金纳米粒子在8000r/min的条件下离心7min,然后用pH7.2的0.01M PBS缓冲液将金纳米粒子进行重悬,并浓缩两倍,测得金纳米粒子的浓度为10nM,然后加入终浓度为30nM的DNA1,在室温下孵育6h后,将纳米粒子在

7000r/min的条件下离心10min,去除上清,用pH8.0的0.01M TE缓冲液将纳米粒子进行重悬,得到DNA1修饰的金纳米粒子;

DNA1的序列为:5’-NH2-AAAAAATGGCATGCC-3’。

5.根据权利要求3所述的一种金纳米粒子-石墨烯量子点手性二聚体的制备方法,其特征在于所述的石墨烯量子点修饰DNA2的步骤为:将5nm石墨烯量子点在12000r/min的条件下离心10min,然后用pH6.5 0.01M MES缓冲液将石墨烯量子点重悬,测得石墨烯量子点的浓度为10nM,然后加入N-羟基琥珀酰亚胺和碳二亚胺,使得石墨烯量子点、N-羟基琥珀酰亚胺、碳二亚胺反应的摩尔比为1: 400:1000,在室温下振荡反应2h使得石墨烯量子点的羧基进行活化,然后离心去除上清,用pH7.2的0.01M PBS缓冲液将石墨烯量子点进行重悬,加入DNA2使得其终浓度为30nM,在室温下振荡反应4h后,12000r/min的条件下离心10min,用pH8.0的0.01M TE缓冲液将纳米粒子进行重悬,得到DNA2修饰的石墨烯量子点;

DNA2的序列为:5’-NH2-AAAAAGGCATGCCAT-3’。

6.根据权利要求1所述的一种金纳米粒子-石墨烯量子点手性二聚体的制备方法,其特征在于所述的金纳米粒子和石墨烯量子点形成二聚体结构的步骤为:将制备的DNA1修饰的金纳米粒子和DNA2修饰的石墨烯量子点等体积混合,在室温下孵育2h,使得金纳米粒子上的DNA1和石墨烯量子点上的DNA2互补杂交。