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专利号: 2017101659467
申请人: 临沂大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2026-04-02
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种检测溶菌酶的方法,步骤如下:

1)将金属有机骨架溶液滴涂到金电极表面,25~42℃孵育2~4h,水洗涤金电极表面,氮气吹干后,得到金属有机骨架修饰金电极;再将溶菌酶适体溶液滴涂到所述金属有机骨架修饰金电极表面,25~42℃孵育1~3h,再次水洗涤金电极表面,氮气吹干;以得到的溶酶体适体-金属有机骨架修饰金电极为工作电极,采用三电极系统进行第一电化学阻抗谱检测,得到基础电阻抗图谱;

2)用水洗涤所述步骤1)第一电化学阻抗谱检测后的金电极,氮气吹干,滴涂待测样品,

25~42℃孵育1~3h,再次水洗涤金电极表面,氮气吹干,进行第二电化学阻抗谱检测,得到待测样品电阻抗图谱;

3)根据所述待测样品电阻抗图谱中的电子转移电阻减去所述基础电阻抗图谱中的电子转移电阻后得到的电子转移电阻差,与预定的标准曲线,得到待测样品中溶菌酶的浓度,所述标准曲线为溶菌酶的浓度与电阻抗差值之间的线性曲线;

所述金属有机骨架的结构如式Ⅰ所示:

所述金属有机骨架的制备方法包括以下步骤:将2-氨基对苯二甲酸溶于挥发性有机溶剂中,得到2-氨基对苯二甲酸溶液;向所述2-氨基对苯二甲酸溶液中逐滴加入强碱溶液,调节混合溶液的pH值为5~6;再将所述调节pH值后的混合溶液与三氯化铈混合,发生配位反应后,产生沉淀,沉淀为金属有机骨架。

2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述金属有机骨架溶液中金属有机骨架的质量体积浓度为0.5~2.5mg/ml。

3.根据权利要求1或2所述的检测方法,其特征在于,所述金属有机骨架的粒度为1~3μm。

4.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述溶菌酶适体溶液中溶菌酶适体的摩尔浓度为0.8~1.2mol/L。

5.根据权利要求1或4所述的检测方法,其特征在于,所述溶菌酶适体的序列为:

5’-ATCAGGGCTAAAGAGTGCAGAGTTACTTAG-3’。

6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述标准曲线的制作中用的标准品溶液至少包括9个梯度浓度,分别为0.8~1.2×10-7mol/L、4.5~5.5×10-8mol/L、0.8~1.2×

10-8mol/L、4.5~5.5×10-9mol/L、0.8~1.2×10-9mol/L、4.5~5.5×10-10mol/L、0.8~1.2×10-10mol/L、4.5~5.5×10-11mol/L和0.8~1.2×10-11mol/L。

7.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述三电极系统包括工作电极、对电极和参比电极,铂丝电极为对电极,Ag/AgCl电极作为参比电极;检测液采用含有铁离子的电解质溶液;

检测条件:频率为0.1~1.0×106Hz,初始电压为0.2~0.3V,振幅为4.0~6.0V。