1.一种可循环式规模化分离β-乳球蛋白的方法,包括样品预处理、双水相萃取、过滤、干燥截留液、滤出液循环使用五个步骤,其特征在于:
1)所述样品预处理步骤:对荷斯坦牛乳、水牛乳或者商业乳清粉中的一种进行预处理,获得乳清液,乳清液蛋白质含量为5%~50%;
2)所述双水相萃取步骤:将步骤1)所得乳清液按照体积比1:20~250加入由聚乙烯比咯烷酮和柠檬酸钠组成的双水相体系,混匀、离心至上下相分离;所述双水相体系中聚乙烯比咯烷酮质量为体系总质量的9~21%,柠檬酸钠质量为体系总质量的15~25%,控制pH值在5.2~
8.2范围内;所述混匀是指搅拌搅拌转数为50~70rpm,搅拌时间20~40min;所述离心的离心转数是指2500~3500rpm,离心时间为10~30min,离心温度为4~37℃;所述上下相分离的上相是指含有部分乳清蛋白的聚乙烯比咯烷酮溶液,下相是指含有大量β-乳球蛋白的柠檬酸钠溶液;
3)所述过滤步骤:取出步骤2)中含有β-乳球蛋白的柠檬酸钠下相溶液,经1~10kDa膜过滤,膜过滤温度为4~37℃,控制压力≤0.2MPa,获得截留液和滤出液;所述截留液是指含有大量β-乳球蛋白的水溶液;所述滤出液是指柠檬酸钠溶液;
4)所述干燥截留液步骤:收集步骤3)中截留的含有大量β-乳球蛋白水溶液(,经干燥获得β-乳球蛋白;
5)所述过滤液循环使用步骤:将步骤3)所得的柠檬酸钠滤出液可用于加入步骤3)的双水相体系,可循环应用于β-乳球蛋白的分离。
2.如权利要求1所述的可循环式规模化分离β-乳球蛋白的方法,其特征在于:所述步骤
1)样品预处理是指荷斯坦牛乳、水牛乳中的一种经巴氏杀菌、脱脂后,调pH至酪蛋白等电点沉淀、离心,收集上层乳清液,经1~6kDa膜过滤,截留液经减压浓缩至蛋白浓度为5%~50%;所述商业乳清粉预处理是指纯度为80~90的商业乳清粉加水溶解,商业乳清粉质量占溶液总质量的5%~50%。
3.如权利要求1所述的可循环式规模化分离β-乳球蛋白的方法,其特征在于:所述步骤
2)双水相萃取步骤中,所述聚乙烯比咯烷酮为PVP3500,PVP4000,PVP5000中的一种。
4.如权利要求1所述的可循环式规模化分离β-乳球蛋白的方法,其特征在于:所述步骤
3)过滤步骤中,所述膜的材质为聚偏氟乙二烯、醋酸纤维酯膜、再生纤维素膜或陶瓷膜中的一种。
5.如权利要求1所述的可循环式规模化分离β-乳球蛋白的方法,其特征在于:所述步骤
4)干燥截留液步骤中,经喷雾干燥所获得β-乳球蛋白可应用于功能食品的产业化加工;经冷冻干燥步骤所获得β-乳球蛋白为活性蛋白,可用于科学研究。
6.如权利要求1所述的可循环式规模化分离β-乳球蛋白的方法,其特征在于:所述5)过滤液循环使用步骤中,将柠檬酸钠滤出液调至一定浓度是指将滤出液的浓度调至与原双水相系统中的柠檬酸钠比重一致。
7.如权利要求1所述的可循环式规模化分离β-乳球蛋白的方法,其特征在于:所述4)干燥截留液步骤中,β-乳球蛋白水溶液干燥的方式为喷雾干燥或冷冻干燥。