1.一种双酶型免疫荧光系统检测痕量黄曲霉毒素B
(1)磁性Fe
(2)MNPs-PEG-Apt的制备:将步骤(1)所得表面具有羧基基团的磁性Fe
(3)AFB
(4)制作标准曲线:将步骤(3)得到的AFB
(5)样品中黄曲霉素的提取与检测:称取5g待测样品于50mL离心管中,加入20 mL甲醇的水溶液,涡旋混匀,置于摇床中振荡20min,在6000rmp/min下离心10min,用旋转蒸发仪将上清液蒸发至干燥,用1mL质量浓度为70%甲醇配制成溶液,过0.22μm滤膜,并在氮气气流下,50℃蒸发至干燥;将干燥的实际样品中加入100μLMNPs-PEG-Apt和500μLAFB1-COD偶联物稀释液,室温下振荡竞争40min,取250μL的上清液加入250μL3.63fM/L的胆碱并振荡均匀,调节体系pH为12.13,室温下静置孵育20min;孵育完成后取100μL该溶液加入到由200μL50μM/LADHP和200μL 0.025μM/LHRP组成的发光溶液中,在40℃下恒温孵育35min后用荧光分光光度计扫描光谱图,激发波长为535nm,观察585nm处的荧光光谱的峰值,带入标准曲线,得到黄曲霉素浓度数值;步骤(4)和(5)中AFB
2.根据权利要求1所述双酶型免疫荧光系统检测痕量黄曲霉毒素B1的方法,其特征在于,步骤(5)待测样品为花生。
3.根据权利要求1所述双酶型免疫荧光系统检测痕量黄曲霉毒素B1的方法,其特征在于,步骤(5)甲醇的水溶液中甲醇和水的体积比为7:3。