1.一种用于黄曲霉毒素B1检测的电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,具体为:
制备纳米金溶液,然后将氧化石墨烯、硫堇、纳米金溶液置于带盖称量瓶中,用搅拌器搅拌
2-8h使瓶内材料充分混匀得到氧化石墨烯/硫堇/纳米金复合材料,将氧化石墨烯/硫堇/纳米金复合材料1-3s内滴于活化后的玻碳电极表面,接着将玻碳电极置于2-8℃冰箱中保存
10-14h,直至玻碳电极表面呈一层固体状薄膜,然后将黄曲霉毒素B1单克隆抗体和玻碳电极先后置于微孔反应板一中,在2-8℃冰箱中静置2-8h,然后将玻碳电极置于2-8℃冰箱中直至玻碳电极表面干燥,再将牛血清蛋白溶液和玻碳电极先后置于微孔反应板二中,在2-8℃冰箱中静置1-5min,取出玻碳电极,在2-8℃冰箱中晾干得到修饰玻碳电极,即电化学免疫传感器;
在氧化石墨烯/硫堇/纳米金复合材料配置过程中:所述氧化石墨烯的浓度为0.5-
1.5wt%,其用量为1体积份A1,硫堇的用量为1重量份B1,纳米金溶液的量为5-12体积份A1;
所述1体积份A1与1重量份B1的关联关系为:1毫升对应1-5毫克;
在电化学免疫传感器的制备过程中:所述氧化石墨烯/硫堇/纳米金复合材料用量为1体积份A2,黄曲霉毒素B1单克隆抗体的用量为100-120体积份A2,牛血清蛋白溶液用量为
100-120体积份A2。
2.根据权利要求1所述用于黄曲霉毒素B1检测的电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述纳米金溶液是将1体积份A3的质量分数为0.005-0.05%的氯金酸溶液倒入容器,加热搅拌至溶液沸腾并持续1-10min,加入0.01-0.1体积份A3的质量分数为0.2-5%的柠檬酸钠溶液,继续反应1-20min至合成液不再变色,停止加热,继续搅拌,待合成液冷却至
20-28℃后,装瓶放入2-8℃冰箱储存。
3.根据权利要求1所述用于黄曲霉毒素B1检测的电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述玻碳电极在氧化石墨烯/硫堇/纳米金复合材料滴在其上之前依次经0.1-0.6μm、0.01-0.1μm粒径的氧化铝粉末在麂皮上打磨至表面光滑、无肉眼可见刮痕,将抛光后玻碳电极上残留的氧化铝粉末用去离子水冲洗干净,然后将该玻碳电极先后放入无水乙醇、去离子水中均超声清洗2-10min,将清洗后的玻碳电极放入0.03-0.5mol/L的硫酸溶液中,然后用循环伏安扫描法在0-3.6V的电压范围内扫描2-15圈以活化电极,活化完毕后,用去离子水将活化电极冲洗干净。
4.根据权利要求1所述用于黄曲霉毒素B1检测的电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述牛血清蛋白溶液是将每0.1-0.5g的牛血清蛋白用PH6.5-7.4磷酸盐缓冲溶液溶解定容60-120mL,得到体积分数为0.1-0.4%的牛血清蛋白溶液。
5.根据权利要求4所述用于黄曲霉毒素B1检测的电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述PH6.5-7.4的磷酸盐缓冲溶液是由0.01-0.15mol/L的磷酸氢二钾和0.01-
0.15mol/L磷酸二氢钠按1:0.9-0.5的比例混合成。
6.根据权利要求1所述用于黄曲霉毒素B1检测的电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述搅拌器为磁力搅拌器,磁力搅拌器包括搅拌磁子、磁力搅拌台,所述搅拌磁子置于称量瓶中,称量瓶置于磁力搅拌台上。
7.一种用于黄曲霉毒素B1检测的电化学免疫传感器使用方法,其特征在于,具体为:制备PH6.5-7.4的磷酸盐缓冲溶液,然后取抗原原液加入到磷酸盐缓冲溶液中,多次稀释得到浓度不同且等比例缩小的多份抗原稀释液底液,然后分别将不同的底液用磁力搅拌器搅拌
20-70s使其混合均匀,将不同的搅拌后的底液滴在玻碳电极表面,分别采用三电极系统进行检测。
8.根据权利要求7所述用于黄曲霉毒素B1检测的电化学免疫传感器的使用方法,其特征在于,所述三电极系统包括:修饰玻碳电极为工作电极,铂电极为对电极,饱和氯化钾电极为参比电极。
9.根据权利要求7所述用于黄曲霉毒素B1检测的电化学免疫传感器的使用方法,其特征在于,所述电化学免疫传感器对于黄曲霉毒素B1的检测过程在氮气氛围中进行。