1.一种检测耐药菌中β‑内酰胺酶的近红外荧光探针,其特征在于,其结构式为:
2.根据权利要求1所述的一种检测耐药菌中β‑内酰胺酶的近红外荧光探针的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)、将2,3,3‑三甲基‑3H‑吲哚和3‑溴丙酸在无溶剂的条件下搅拌反应,反应结束后,冷却,反应物用二氯甲烷超声溶解,之后用溶剂沉淀,重复三次,得到白色沉淀1‑(2‑羧乙基)‑
2,3,3‑三甲基‑3H‑吲哚;
2)、将1‑(2‑羧乙基)‑2,3,3‑三甲基‑3H‑吲哚、(E)‑2氯‑3‑(羟亚甲基)环己烯‑1‑甲醛和无水乙酸钠加入醋酸酐搅拌反应,反应结束后,减压浓缩,然后倒入蒸馏水中,用二氯甲烷萃取,收集下层有机相,减压浓缩,粗产物经硅胶柱层析纯化,得到绿色固体1‑(2‑羧乙基)‑2‑((E)‑2‑(E)‑3‑(2‑(E)‑1‑(2‑羧乙基)‑3,3‑二甲基‑2‑亚甲基)亚乙烯)‑2‑氯环己基‑1‑烯‑1‑基)乙烯基)‑3,3‑二甲基‑3H‑吲哚;
3)、在N2保护下,将3‑羟基苯硫酚、碳酸钾和有机溶剂在50℃下搅拌30min,随后加入含有1‑(2‑羧乙基)‑2‑((E)‑2‑(E)‑3‑(2‑(E)‑1‑(2‑羧乙基)‑3,3‑二甲基‑2‑亚甲基)亚乙烯)‑2‑氯环己基‑1‑烯‑1‑基)乙烯基)‑3,3‑二甲基‑3H‑吲哚的乙腈,所得混合溶液在55℃下搅拌3h,减压浓缩,粗产物经硅胶柱层析纯化,得到蓝色固体(E)‑1‑(2‑羧基乙基)‑2‑(2‑(6‑羟基‑2,3‑二氢‑1H‑硫杂蒽‑4‑基)乙烯基)‑3,3‑二甲基‑3H‑吲哚;
4)、将(E)‑1‑(2‑羧基乙基)‑2‑(2‑(6‑羟基‑2,3‑二氢‑1H‑硫杂蒽‑4‑基)乙烯基)‑3,3‑二甲基‑3H‑吲哚和缩合剂加入DMF溶解,室温下搅拌20min,然后滴加含有7‑苯乙酰氨基‑3‑氯甲基‑4‑头孢烷酸对甲氧基苄酯的DMF溶液,继续搅拌30min,减压浓缩,粗产物经硅胶柱层析纯化,得到蓝色固体化合物,随后将蓝色固体化合物溶于苯甲醚、三氟乙酸和二氯甲烷的混合溶液中,在0℃下搅拌1h,减压浓缩,粗产物经硅胶柱层析纯化,得到蓝色固体2‑((E)‑2‑(((7S)‑2‑羧基‑8‑氧基‑7‑(2‑苯乙酰胺)‑5‑硫‑1‑氮杂环[4.2.0]辛‑2‑烯‑3‑基)甲氧基)‑2,3‑二氢‑1H‑硫杂蒽‑4‑基)乙烯基)‑1‑(2‑羧乙基)‑3,3‑二甲基‑3H‑吲哚‑1‑铵,即荧光探针。
3.根据权利要求2所述的一种检测耐药菌中β‑内酰胺酶的近红外荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤1)中所述反应的温度为90℃,反应的时间为60min;步骤2)中所述反应的条件是在室温下反应6h。
4.根据权利要求2所述的一种检测耐药菌中β‑内酰胺酶的近红外荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤2)中所述的1‑(2‑羧乙基)‑2,3,3‑三甲基‑3H‑吲哚、(E)‑2氯‑3‑(羟亚甲基)环己烯‑1‑甲醛和无水乙酸钠的摩尔比为2:1:3。
5.根据权利要求2所述的一种检测耐药菌中β‑内酰胺酶的近红外荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤2)、3)中所述的硅胶柱层析是体积比为20:1的二氯甲烷与甲醇的混合物;步骤4)中所述的硅胶柱层析是体积比为25:1或2:1的二氯甲烷与甲醇的混合物。
6.根据权利要求2所述的一种检测耐药菌中β‑内酰胺酶的近红外荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤1)中所述的溶剂为乙酸乙酯;步骤3)中所述的有机溶剂为乙腈或DMF;
步骤4)中所述的缩合剂为Cs2CO3。
7.根据权利要求2所述的一种检测耐药菌中β‑内酰胺酶的近红外荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤4)中所述的苯甲醚、三氟乙酸和二氯甲烷的体积比为1:4:20。
8.根据权利要求1所述的一种检测耐药菌中β‑内酰胺酶的近红外荧光探针的应用,其特征在于,所述探针用于制备耐药菌的检测试剂。
9.根据权利要求1所述的一种检测耐药菌中β‑内酰胺酶的近红外荧光探针在制备试剂盒中的应用,其特征在于,所述试剂盒用于耐药菌的筛选。