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专利号: 2022109476342
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机高分子化合物;其制备或化学加工;以其为基料的组合物
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种海洋杂色曲霉胞外多糖,其特征在于:所述的海洋杂色曲霉胞外多糖AVP141‑A为具有式1所示的结构的多糖:

2.根据权利要求1所述的海洋杂色曲霉胞外多糖,其特征在于:所述海洋杂色曲霉胞外多糖是将海洋杂色曲霉Aspergillus versicolor SCAU141接种至发酵液培养基中发酵,得发酵液,对发酵液过滤、浓缩、醇沉、除蛋白、透析、冻干后得粗多糖,粗多糖再经DEAE离子交换柱、G‑100凝胶柱层析分离纯化,得平均分子量为4082Da的胞外多糖AVP141‑A;

所述海洋杂色曲霉胞外多糖AVP141‑A的单糖组成为100%葡萄糖;

所述海洋杂色曲霉胞外多糖AVP141‑A的糖苷键类型为:[Glcp‑(1→],[→4)‑Glcp‑(1→],[→6)‑Glcp‑(1→],和[→4,6)–Glcp‑(1→],且摩尔比为16.93:58.80:7.38:16.89。

3.根据权利要求2所述的海洋杂色曲霉胞外多糖,其特征在于:所述海洋杂色曲霉胞外多糖AVP141‑A不含有核酸和蛋白质;

所述海洋杂色曲霉胞外多糖AVP141‑A不含有糠醛酸;

所述海洋杂色曲霉胞外多糖AVP141‑A的硫酸根含量为3.62%。

4.一种权利要求1‑3任意一项所述的海洋杂色曲霉胞外多糖的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:

(1)制备发酵液培养基:发酵培养基组成为:麦芽糖20g/L、葡萄糖10g/L、甘露糖20g/L、谷氨酸钠10g/L、七水硫酸镁0.3g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、玉米浆1g/L、酵母膏3g/L以及海盐

30g/L,调整发酵培养基pH值为6.8‑7.5,灭菌,得发酵液培养基;

(2)接种培养:将海洋杂色曲霉Aspergillus versicolor SCAU141孢子接种至步骤(1)所述的发酵液培养基中培养,得发酵液;

(3)除菌体、浓缩:将所述步骤(2)中的发酵液过滤,滤液60℃减压浓缩,得浓缩液;

(4)醇沉:向步骤(3)所述的浓缩液中加入无水乙醇,4℃静置,离心收集沉淀,沉淀溶于水,得粗多糖液;

(5)除蛋白:向步骤(4)所述的粗多糖液中加入Savage试剂,摇床震荡,离心,保留水相,透析,冻干后得粗多糖AVP141;

(6)DEAE离子交换柱分离:用水将步骤(5)所述的粗多糖AVP141配置成10mg/mL溶液,离心,取上清液上样,以0~2mol/L的NaCl溶液洗脱,收集洗脱液,透析,冻干得到粗多糖AVP141‑I;

(7)G‑100、G‑25凝胶柱层析纯化:将步骤(6)所述的粗多糖AVP141‑I用超纯水洗脱,透析,冻干得到粗多糖AVP141‑1,使用G‑100葡聚糖凝胶分离AVP141‑1,收集洗脱液,透析,冻干得到均一组分多糖AVP141‑A。

5.根据权利要求4所述的海洋杂色曲霉胞外多糖的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中接种培养的温度为26±3℃,培养时间为6‑8天。

6.根据权利要求4所述的海洋杂色曲霉胞外多糖的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中浓缩液为原体积1/5‑1/4。

7.根据权利要求1所述的海洋杂色曲霉胞外多糖的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)中浓缩液:无水乙醇=1:(4‑5),v/v。

8.权利要求1所述的海洋杂色曲霉胞外多糖AVP141‑A在制备免疫活性调节试剂中的应用。

9.根据权利要求8所述的海洋杂色曲霉胞外多糖AVP141‑A在制备免疫活性调节试剂中的应用,其特征在于:所述免疫活性调节试剂为调节RAW264.7巨噬细胞的免疫活性的试剂。