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专利号: 2022109470346
申请人: 吉林农业科技学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种血液基因组DNA提取试剂盒,其特征在于,由如下组分组成:裂解液、结合液、漂洗液1、漂洗液2和洗脱液;

所述裂解液的制备方法为:将20~22g一水合高氯酸钠用水溶解,定容到50mL即得;

所述漂洗液1制备方法为:将6~7g脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠和2~2.5g NaCl用乙醇溶解,用水定容到200mL,调节pH值为7.8~8.2即得;所述漂洗液1中乙醇的体积浓度为45~

55%;

所述漂洗液2的制备方法为:将0.22~0.26g Tris和2~2.5g NaCl用水溶解,定容到

200mL,调节pH值为5.8~6.2即得。

2.根据权利要求1所述的一种血液基因组DNA提取试剂盒,其特征在于,所述结合液为异丙醇。

3.根据权利要求1~2任意一项所述的一种血液基因组DNA提取试剂盒,其特征在于,所述洗脱液的制备方法为:将0.022~0.26g Tris用水溶解,定容到20mL,用HCl调节pH值为

7.8~8.2即得。

4.权利要求1~3任意一项所述试剂盒的使用方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将血液样品、蛋白酶K和裂解液混合后68~72℃水浴8~12min,得到物料1;

(2)将物料1、结合液和磁珠混合后静置7~11min,得物料2;

(3)将物料2吸附2~4min后弃清液得物料3;

(4)将物料3先用漂洗液1漂洗1~3次再用漂洗液2漂洗1~3次,得物料4;

(5)将物料4和洗脱液混合,得到血液基因组DNA。

5.根据权利要求4所述的使用方法,其特征在于,所述步骤(1)中血液样品、蛋白酶K和裂解液的体积比为8~12:1:8~12;所述步骤(2)中物料1、结合液和磁珠的体积比为40~

44:19~21:1。

6.根据权利要求5所述的使用方法,其特征在于,所述步骤(4)中漂洗液1漂洗的方法为:将物料3和漂洗液1混合后涡旋50~70s,吸附2~4min后弃清液;所述漂洗液1的用量为磁珠体积的35~45倍;所述步骤(4)中漂洗液2漂洗的方法为:将物料3和漂洗液2混合后涡旋50~70s,吸附2~4min后弃清液;所述漂洗液2的用量为磁珠体积的25~35倍。

7.根据权利要求5所述的使用方法,其特征在于,所述步骤(5)中混合后在58~62℃振荡8~12min,吸附4~6min后得到血液基因组DNA;所述洗脱液的用量为磁珠体积的2.5~5倍。