1.一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于该制备方法按以下步骤进行：

步骤S1：表达质粒pMA‑criC的构建；

以泾渭茯茶共生菌(Eurotium cristatum)的基因组DNA为模版，以P1F为正向引物、P1R为反向引物，扩增获得环二肽合酶编码基因criC的片段一，然后以P2F为正向引物、P2R为反向引物，扩增获得环二肽合酶编码基因criC的片段二；再以泾渭茯茶共生菌(Eurotium cristatum)的基因组DNA为模版，以pMA质粒经KpnI酶切线性化处理的片段为载体，将环二肽合酶编码基因criC的片段一和片段二插入pMA质粒的限制性位点KpnI，获得表达质粒pMA‑criC；

引物P1F的序列为aattcgagctcggtaccATGTGAAGCTGATATTCATTC，引物P1R的序列为gaccaaggtagcgTAGGTAATTGAATGTGACCCTTTTTG ，引物P2F的序列为ttacctaCGCTACCTTGGTCCAATATGCA，引物P2R的序列为tactacagatccccgggtaccCTATACCACCGTTAGATACTGTCGCG；

步骤S2：携带有L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的高产菌株的获得；

取米曲霉(Aspergillus oryzae)的孢子保存液接入DPY培养基中，振荡培养2～3天，获得米曲霉(Aspergillus oryzae)的菌体；然后加入细胞壁溶解液，温和振荡2～3小时，获得原生质体；向原生质体内加入缓冲液II和缓冲液III，再加入表达质粒pMA‑criC，混匀后冰浴18～20min，向混合体系加入缓冲液III，室温孵育18～20min，然后加入缓冲液II，混匀后离心8～10min，除去上清液后加入缓冲液II，混匀后转移到改良的察氏培养基平板上，然后加入覆盖培养基，倒置培养3～7天；待上述培养基长出菌丝后，利用PCR对其验证，阳性转化子进行2次继代培养后，获得携带有L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的高产菌株；

所述的缓冲液II由1.2M山梨糖醇、50mM氯化钙溶液、50mM氯化钠溶液和10mM氨基丁三醇组成，且pH调至7.5；所述的缓冲液III由40％聚乙二醇‑4000、50mM氯化钙溶液和50mM氨基丁三醇组成；所述的改良的察氏培养基按以下步骤制备：每200mL改良的察氏培养基含有

7.0g察氏培养基、9.3g NaCl、1.8g(NH4)2SO4、20mg腺嘌呤、300mg甲硫氨酸和3g琼脂粉；

步骤S3：L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的制备；

将携带有L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的高产菌株的菌丝接种于灭菌后的填装有大米的培养基中，对培养基萃取、浓缩，获得发酵液浸膏；将发酵液浸膏通过高效液相色谱仪制备，得到L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽。

2.根据权利要求1所述的一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于步骤S1中将环二肽合酶编码基因criC的片段一和片段二及经KpnI酶切线性化处理的pMA质粒片段按照1:1:2的摩尔比混合，利用多片段连接试剂盒进行连接，连接完成后将连接体系转化到大肠杆菌DH5α，过夜培养后获得阳性克隆子，最后经过PCR验证和酶切验证后，获得表达质粒pMA‑criC。

3.根据权利要求1所述的一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于步骤S2中基于表达质粒pMA‑criC的L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的高产菌株的培养的步骤如下：取米曲霉(Aspergillus oryzae)的孢子保存液接入到含有100mL的DPY培养基中，在28～30℃下、以180～200rpm的转速振荡培养2～3天，获得米曲霉(Aspergillus oryzae)的菌体；将米曲霉(Aspergillus oryzae)的菌体过滤收集后用无菌水洗涤3～5次，然后加入20mL细胞壁溶解液，并在25～28℃的温度条件下，温和振荡2～3小时，获得原生质体；利用灭菌过的0.8M NaCl溶液洗涤将原生质洗涤2次，加入缓冲液II和缓冲液III，再加入10μg表达质粒pMA‑criC，混匀后冰浴18～20min，向混合体系加入1mL缓冲液III，室温孵育20分钟，然后加入10mL缓冲液II，混匀后，在2～4℃下以600～800rpm的转速离心8～

10min，除去上清液后加入1mL缓冲液II，混匀后移取200μL混匀液转移到改良的察氏培养基平板上，然后加入5mL、45～50℃的覆盖培养基，待覆盖培养基凝固后封平板，倒置培养3～7天；待含有pMA‑criC转化子长出菌丝后，利用PCR对其验证，阳性转化子进行2次继代培养后，获得L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的高产菌株。

4.根据权利要求1或3所述的一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于所述的DPY培养基按以下步骤制备：2g糊精、1g聚蛋白胨、0.5g酵母粉、10mg腺嘌呤、925mg硫酸铵、150mg甲硫氨酸和60mg精氨酸，加水定量至100mL；覆盖培养基由1.2M山梨糖醇和0.5％琼脂粉组成。

5.根据权利要求1或3所述的一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于所述的细胞壁溶解液由1.0％亚糖酶溶于溶液I中制成；所述的溶液I由0.8M氯化钠溶液和10mM磷酸二氢钠溶液组成。

6.根据权利要求1所述的一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于步骤S3中将携带L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的高产菌株的菌丝接种于灭菌后的填装有大米的培养基中，并在25～28℃下静置培养两周；利用乙酸乙酯对培养基萃取3～5次，浓缩获得发酵液浸膏；利用正相色谱对发酵液浸膏进行粗分，然后利用反相色谱进行细分，再通过高效液相色谱仪制备，得到L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽。

7.根据权利要求1所述的一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于步骤S1中以pMA质粒经KpnI酶切线性化处理的片段为载体，利用非连接酶依赖型的多片段一步克隆试剂盒，将环二肽合酶编码基因criC的片段一和片段二插入pMA质粒的限制性位点KpnI，获得表达质粒pMA‑criC；pMA质粒的质量与KpnI的体积的比为1μg：1μL。

8.如权利要求1所述的一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法获得的表达质粒pMA‑criC，其特征在于其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。