1. 一种突变果胶裂解酶PGLA‑rep4，其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2. 一种突变果胶裂解酶PGLA‑rep4，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3. 一种重组载体，包含权利要求1所述突变果胶裂解酶PGLA‑rep4编码基因的核苷酸序列，如SEQ ID NO.1所示。

4. 一种重组菌，包含权利要求1所述突变果胶裂解酶PGLA‑rep4编码基因的核苷酸序列，如SEQ ID NO.1所示。

5.一种含突变果胶裂解酶PGLA‑rep4基因的大肠杆菌工程菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将合成的pET‑28a(+)‑PGLA质粒通过正向PCR扩增pET‑28a(+)‑PGLA‑4基因片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO. 3所示；

（2）通过正向PCR扩增rep4基因片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO. 4所示；

（3）将步骤（1）中制得的pET‑28a(+)‑PGLA‑4基因片段与步骤（2）制得的rep4基因片段进行无缝克隆连接，得到重组质粒pET‑28a(+)‑PGLA‑rep4，所述重组质粒中包含突变果胶裂解酶PGLA‑rep4编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

（4）制备大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，将步骤（3）制得的重组质粒pET‑28a(+)‑PGLA‑rep4转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，筛选阳性克隆，即得含突变果胶裂解酶PGLA‑rep4的大肠杆菌工程菌。

6. 如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，正向PCR扩增以pET‑28a(+)‑PGLA质粒为模板，扩增引物分别为F1、R1，扩增引物的核苷酸序列分别为 SEQ ID NO. 

5、SEQ ID NO. 6；

所述步骤（1）中，PCR扩增的反应体系如下，总体系为50μl：

2×Phanta Max Master Mix25μlF110μmol/L2μl

R110μmol/L2μl

模板2μl

dd H2O19μl；

PCR扩增程序如下：

95℃预变性3min；95℃变性15sec，60℃退火15sec，72℃延伸3.2min，30个循环；72℃延伸5min，4℃保存。

7. 如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中，正向PCR扩增模板为Pel SWU基因片段，基因序列在NCBI数据库中的登录号为AB428424，扩增引物分别为F2、R2，扩增引物的核苷酸序列分别为 SEQ ID NO. 7、SEQ ID NO. 8；

所述步骤（2）中，PCR扩增的反应体系如下，总体系为50μl：

2×Phanta Max Master Mix25μlF210μmol/L2μl

R210μmol/L2μl

模板2μl

dd H2O19μl；

所述的PCR扩增程序如下：

95℃预变性3min；95℃变性15sec，60℃退火15sec，72℃延伸15sec，30个循环；72℃延伸5min，4℃保存。

8. 如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤（3）中，无缝克隆PCR扩增体系如下，总体系为20μl：pET‑28a(+)‑PGLA‑41μl

rep41μl

5 × CE II Buffer4μl

Exnase II2μl

dd H2O12μl

所述的无缝克隆程序如下：

37℃反应30min，4℃保存。

9.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤（4）中，筛选阳性克隆的方法为：将转化细胞涂布在含有50μg/mL卡纳霉素的LB固体培养基上，37℃过夜培养，挑取单菌落接种至含有50μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中37℃培养过夜，然后通过PCR验证，得到目的基因条带的阳性克隆子，然后测序，保留测序结果正确的菌株作为目的表达菌株。

10.权利要求4中所述重组菌在生产果胶裂解酶中的应用。