1.一种碱性果胶酶突变体,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.编码权利要求1所述碱性果胶酶突变体的基因。
3.含有权利要求1所述碱性果胶酶突变体的细胞系。
4.携带权利要求2所述基因的载体。
5.一种提高碱性果胶酶热稳定性的方法,其特征在于,将SEQ ID NO.3所示碱性果胶酶的N端通过PT-Linker连接SEQ ID NO.4所示的双亲短肽。
6.一种产碱性果胶酶的基因工程菌,其特征在于,以大肠杆菌为宿主、以pET-22b(+)为载体,表达SEQ ID NO.1所示碱性果胶酶突变体。
7.权利要求6所述基因工程菌的构建方法,是以pET-22b(+)为载体,将SEQ ID NO.2所示基因与载体连接,转化至大肠杆菌中。
8.一种碱性果胶酶的生产方法,其特征在于,是将权利要求5所述的基因工程菌接种至发酵培养基,于30~37℃培养至OD600=0.6~1.0,加入终浓度0.04~0.06mmol/L的IPTG,于
28~30℃诱导24~72h。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述接种是按体积接种3~5%的种子液。
10.根据权利要求8或9所述的方法,其特征在于,发酵培养基为TB培养基。
11.权利要求6所述的基因工程菌在在纺织、食品、造纸、环境领域制备碱性果胶酶中的应用。