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专利号: 2022102651711
申请人: 山东润德生物科技有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种分泌几丁二糖脱乙酰酶的枯草芽孢杆菌,其特征在于:所述枯草芽孢杆菌融合表达了氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的几丁二糖脱乙酰酶与核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的Pgrac100启动子。

2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌,其特征在于:所述几丁二糖脱乙酰酶和Pgrac100启动子以pP43NMK为载体进行融合表达。

3.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌,其特征在于:所述枯草芽孢杆菌通过RBS序列调控几丁二糖脱乙酰酶的表达,所述RBS序列为SEQ ID NO.4‑6所示序列之一。

4.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌,其特征在于:所述枯草芽孢杆菌过表达细胞壁合成蛋白EzrA。

5.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌,其特征在于:以枯草芽孢杆菌B.subtilis C6为宿主。

6.一种生产氨基葡萄糖的方法,其特征在于:以权利要求1‑5任一项所述的枯草芽孢杆菌发酵上清液为催化剂,催化N‑乙酰氨基葡糖转化为氨基葡萄糖。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述枯草芽孢杆菌发酵上清液通过将枯草芽孢杆菌种子液接种至发酵培养基中,在35‑40℃培养6‑12h进行IPTG诱导,在35‑40℃诱导

48‑72h,再经离心得到。

8.权利要求1‑5任一项所述的枯草芽孢杆菌在制备几丁二糖脱乙酰酶、含有几丁二糖脱乙酰酶的产品、氨基葡萄糖或含有氨基葡萄糖的产品中的应用。

9.一种平衡枯草芽孢杆菌生长和几丁二糖脱乙酰酶生产的方法,其特征在于:所述的方法包括在枯草芽孢杆菌中融合表达编码几丁二糖脱乙酰酶的基因和Pgrac100启动子,以及过表达细胞壁合成蛋白EzrA。

10.一种提高枯草芽孢杆菌对几丁二糖脱乙酰酶耐受性的方法,其特征在于:所述的方法包括在枯草芽孢杆菌中过表达细胞壁合成蛋白EzrA。