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专利号: 2021115486614
申请人: 陕西师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种具有良好乳化性能的核桃多肽,其特征在于:所述核桃多肽是氨基酸序列为Glu‑Lys‑Val‑Ser‑Tyr‑Asp‑His‑Cys‑Ile‑Met‑Ser‑Leu‑Asp、 Gly‑Gln‑Phe‑His‑Ala‑Trp‑Lys‑Asn‑Pro‑Asn‑Thr‑Met‑Ser 和 Asp‑Glu‑His‑Val‑Leu‑Lys‑Phe‑Gly‑Met‑Thr‑Cys的多肽混合物,各多肽占核桃多肽的质量百分比依次为 30%~40%、20%~30%、35%~45%。

2.一种权利要求1所述的具有良好乳化性能的核桃多肽的制备方法,其特征在于所述方法由下述步骤组成:

(1)核桃蛋白的提取

① 脱脂:将核桃粕过100目筛后,按料液比为1g:4~8mL加入石油醚中,于室温下脱脂后自然晾干,得到脱脂核桃粕;

② 碱提酸沉:按料液比为1g:12~20mL,将脱脂核桃粕加入去离子水中,用1mol/L的NaOH水溶液调节溶液的pH值至10~12,50~55℃搅拌使蛋白充分溶解后,冷却至室温,离心分离,用1mol/L的HCl水溶液将上清液pH值调至4~5,静置沉淀后离心,用去离子水洗涤沉淀至中性,经真空冷冻干燥后得到核桃蛋白;

(2)核桃蛋白的酶解

按料液比为0.8~1.2g:100mL,将核桃蛋白溶于去离子水,用0.5mol/L NaOH水溶液调节溶液pH至7.5~8.5,加入胰蛋白酶进行限制性酶解,所述限制性酶解的温度为35~40℃,时间为2~4小时;酶解过程中实时监控反应液pH值,不断使用0.5mol/L NaOH水溶液调节反应液pH值,使反应液pH值与初始pH值保持一致;酶解完后置于沸水浴中8~10min灭活酶,然后迅速冷却至室温,调节溶液pH值至7.0,离心取上清液得到核桃蛋白酶解液;

(3)核桃蛋白酶解产物的分离纯化

① 超滤分离:使用孔径0.45 µm的微孔滤膜对核桃蛋白酶解液过滤,然后采用1kDa、

3kDa、5kDa的超滤膜依次进行分离,收集3~5kDa的组分,冷冻干燥;

② 葡聚糖凝胶G‑25凝胶层析:将冷冻干燥后的组分用去离子水配制成核桃多肽液,经

0.45µm的微孔滤膜进行过滤,去除杂质后,采用葡聚糖凝胶G‑25凝胶进行上样,洗脱液为蒸馏水,洗脱流速为1mL/min,收集保留时间在12~15min的组分,将该组分真空冷冻干燥即得到乳化性能良好的核桃多肽。

3.根据权利要求2所述的具有良好乳化性能的核桃多肽的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述胰蛋白酶的加入量为核桃蛋白质量的4%~6%。

4.根据权利要求2所述的具有良好乳化性能的核桃多肽的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,所述超滤膜材质为再生纤维素,滤膜直径为44.5 mm。