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专利号: 2021113535372
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.化合物I在制备抑制海洋污损细菌生长剂中的应用,其特征在于:所述的海洋污损细菌选自假单胞菌、赤杆菌;

所述化合物I,结构式如式I所示:

2.化合物Π在制备抑制海洋污损细菌生长剂中的应用,其特征在于:所述的海洋污损细菌选自鲁杰氏菌、希瓦氏菌;

所述化合物Π,结构式如式Π所示:

3.化合物Ш在制备抑制海洋污损细菌生长剂中的应用,其特征在于:所述的海洋污损细菌选自嗜冷杆菌、交替单胞菌、假单胞菌、弧菌;

所述化合物Ш,结构式如式Ш所示:

4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述化合物I由海洋曲霉菌Aspergillus sp.SCAU137发酵制备获得;

海洋曲霉菌Aspergillus sp.SCAU137的保藏编号为GDMCC NO:61104;

化合物I的制备方法如下,包括以下步骤:

1)将所述的海洋曲霉菌Aspergillus sp.SCAU137接种到PDA琼脂培养基培养,得到有菌种的平板,挑取菌种在PDB培养基中培养,得到种子液;

2)得到的种子液加入大米固体培养基中,进行发酵培养,得到包括生物碱的发酵产物;

3)将得到的发酵产物超声破碎,丙酮‑水提取,提取液减压浓缩,浓缩水相乙酸乙酯萃取,得乙酸乙酯萃取物;丙酮‑水提取时,丙酮‑水提的比例为4:1;

4)所述乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析,以氯仿‑甲醇体系梯度洗脱分离,氯仿‑甲醇体系比例为95:5,得到馏分Fr.1;

5)所述馏分Fr.1经正向硅胶柱层析,以氯仿‑丙酮体系梯度洗脱分离,再经ODS反向柱层析,甲醇‑水体系梯度洗脱分离,甲醇‑水体系比例为7:3,再经阳离子高效液相纯化,纯化溶剂为甲醇‑水,比例为65:35,得化合物I。

5.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述化合物Π由海洋曲霉菌Aspergillus sp.SCAU137发酵制备获得;

海洋曲霉菌Aspergillus sp.SCAU137的保藏编号为GDMCC NO:61104;

化合物Π的制备方法如下,包括以下步骤:

1)将所述的海洋曲霉菌Aspergillus sp.SCAU137接种到PDA琼脂培养基培养,得到有菌种的平板,挑取菌种在PDB培养基中培养,得到种子液;

2)得到的种子液加入大米固体培养基中,进行发酵培养,得到包括生物碱的发酵产物;

3)将得到的发酵产物超声破碎,丙酮‑水提取,提取液减压浓缩,浓缩水相乙酸乙酯萃取,得乙酸乙酯萃取物;丙酮‑水提取时,丙酮‑水提的比例为4:1;

4)所述乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析,以氯仿‑甲醇体系梯度洗脱分离,氯仿‑甲醇体系比例为98:2,得到馏分Fr.2;

5)所述馏分Fr.2经Sephadex LH‑20柱层析,以氯仿‑甲醇体系梯度洗脱分离,氯仿‑甲醇体系比例为1:1,得Fr.2‑1,当Fr.2‑1经ODS柱层析,以甲醇‑水体系梯度洗脱分离,再经Sephadex LH‑20柱纯化,纯化溶剂为甲醇‑水,比例为3:2,得化合物Π。

6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述化合物Ш由海洋曲霉菌Aspergillus sp.SCAU137发酵制备获得;

海洋曲霉菌Aspergillus sp.SCAU137的保藏编号为GDMCC NO:61104;

化合物Ш的制备方法如下,包括以下步骤:

1)将所述的海洋曲霉菌Aspergillus sp.SCAU137接种到PDA琼脂培养基培养,得到有菌种的平板,挑取菌种在PDB培养基中培养,得到种子液;

2)得到的种子液加入大米固体培养基中,进行发酵培养,得到包括生物碱的发酵产物;

3)将得到的发酵产物超声破碎,丙酮‑水提取,提取液减压浓缩,浓缩水相乙酸乙酯萃取,得乙酸乙酯萃取物;丙酮‑水提取时,丙酮‑水提的比例为4:1;

4)所述乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析,以氯仿‑甲醇体系梯度洗脱分离,氯仿‑甲醇体系比例为98:2,得到馏分Fr.2;

5)所述馏分Fr.2经Sephadex LH‑20柱层析,以氯仿‑甲醇体系梯度洗脱分离,氯仿‑甲醇体系比例为1:1,得Fr.2‑1,当Fr.2‑1经ODS柱层析,以甲醇‑水体系梯度洗脱分离,再经阳离子高效液相纯化,纯化溶剂为甲醇‑水,比例为3:2,得化合物Ш。