欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13336804447 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13336804447
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2021113518678
申请人: 湖南师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一种具有防治鱼类杀鲑气和迟缓爱德华氏菌感染的二联疫苗,其特征在于:所述二联疫苗为工程菌株DBFF01‑T3SS‑GAPDH,其拉丁文名称为Aeromonas salmonicida DBFF01‑T3SS‑GAPDH,该菌株已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址:中国,武汉,武汉大学,保藏编号:CCTCC NO:M 2021557,保藏日期:2021年05月19日。

2.如权利要求1所述一种具有防治鱼类杀鲑气和迟缓爱德华氏菌感染的二联疫苗,其特征在于:所述DBFF01‑T3SS‑GAPDH菌株的T3SS编码基因来源于P. luminescens TT01,其GAPDH编码基因来源于迟缓爱德华氏菌。

3.如权利要求2所述一种具有防治鱼类杀鲑气和迟缓爱德华氏菌感染的二联疫苗,其特征在于:所述T3SS的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.如权利要求2所述一种具有防治鱼类杀鲑气和迟缓爱德华氏菌感染的二联疫苗,其特征在于:所述P. luminescens TT01菌株中的III型效应因子LopT的N端信号肽编码基因与迟缓爱德华氏菌的GAPDH编码基因融合,并构建了该融合基因与LopT蛋白的伴侣蛋白SlcT编码基因的共表达载体LopT‑GAPDH‑3FALG‑SlcT。

5.如权利要求4所述一种具有防治鱼类杀鲑气和迟缓爱德华氏菌感染的二联疫苗,其特征在于:所述LopT‑GAPDH‑3FALG‑SlcT的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,其编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

6.如权利要求1所述一种具有防治鱼类杀鲑气和迟缓爱德华氏菌感染的二联疫苗,其特征在于:所述二联疫苗的接种方式为浸泡免疫。

7.一种如权利要求1‑6任一项所述具有防治鱼类杀鲑气和迟缓爱德华氏菌感染的二联疫苗的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:

1)通过三亲本结合转移将P. luminescens TT01菌株的T3SS插入杀鲑气单胞菌DBFF01的基因组上,获得重组菌株DBFF01‑T3SS;

2)构建pBBR1‑Cm‑GAPDH原核表达质粒;

3)将pBBR1‑Cm‑GAPDH原核表达质粒电击转化至E. coli MFDpir中,获得接合转移供体菌株MFDpir/pBBR1‑Cm‑GAPDH;

4)通过双亲本接合转移将pBBR1‑Cm‑GAPDH原核表达质粒转入重组菌株DBFF01‑T3SS中,获得菌株DBFF01‑T3SS‑GAPDH。

8.如权利要求7所述一种具有防治鱼类杀鲑气和迟缓爱德华氏菌感染的二联疫苗的制备方法,其特征在于:所述步骤2)的具体操作步骤为:采用PCR扩增方法扩增LopT‑GAPDH‑

3FLAG‑SlcT的基因片段,并克隆到表达质粒pBBR1MCS2‑Tac‑mCherry‑Cm,获得重组质粒pBBR1‑Cm‑GAPDH。

9.一种如权利要求1‑6任一项所述具有防治鱼类杀鲑气和迟缓爱德华氏菌感染的二联疫苗的应用,其特征在于:所述二联疫苗用于制备抗鱼类病原菌感染药物。

10.一种如权利要求1‑6任一项所述具有防治鱼类杀鲑气和迟缓爱德华氏菌感染的二联疫苗的应用,其特征在于:所述二联疫苗应用于水产养殖鱼类的疫苗接种。