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专利号: 2021112425642
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一株可合成樱桃苷的酿酒酵母,其特征在于,以含有柚皮素合成途径的酿酒酵母E32为出发菌株,表达了核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的来源于Arabidopsis thaliana的葡萄糖基转移酶基因UGT73C6,其替换酿酒酵母基因组上的EXG1基因,还进行了如下改进:(1)敲除了酿酒酵母内源糖苷水解酶基因SPR1;

(2)过量表达酿酒酵母内源基因PGM1、UGP1、URA6和YNK1;

(3)引入了异源蔗糖磷酸化酶途径基因galU;

(4)过量表达莽草酸途径基因ARO1、ARO2、ARO3和aroL;其中,基因PGM1、UGP1、URA6和YNK1的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示,基因galU的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示,基因ARO1、ARO2、ARO3和aroL的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示。

2.根据权利要求1所述的酿酒酵母,其特征在于,利用启动子PCCW12起始UGT73C6基因表达。

3.根据权利要求1或2所述的酿酒酵母,其特征在于,用启动子PTDH3起始PGM1基因的表达;用启动子PPGK1起始UGP1基因的表达;用启动子PFBA1起始URA6基因的表达;用启动子PENO2起始YNK1基因的表达;用启动子PTDH3起始galU基因的表达。

4.一种生产樱桃苷的方法,其特征在于,应用权利要求1 3任一所述的酿酒酵母发酵,~收集发酵液中的樱桃苷;所述发酵是将所述酿酒酵母接种于YPD培养基中,于25 30℃发酵~至少72 h。

5.权利要求1 3任一所述的酿酒酵母或权利要求4所述方法在生产樱桃苷或含樱桃苷~的产品中的应用。