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专利号: 2021111939723
申请人: 西南科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2026-04-06
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一株高产脂肪酶菌株,其特征在于,其分类命名为Acinetobacter junii WCO‑9,已于2021年8月2日在广东省微生物菌种保藏中心登记保藏,保藏编号为GDMCC No:61851。

2.一种如权利要求1所述的高产脂肪酶菌株在油脂降解中的应用。

3.如权利要求2所述的高产脂肪酶菌株在油脂降解中的应用,其特征在于,将植物油和浓度为3~5wt%的PVA混合,超声乳化,制成乳化液,将乳化液和LB培养基混合,接种高产脂肪酶菌株Acinetobacter junii WCO‑9,恒温培养,实现油脂降解。

4.如权利要求3所述的高产脂肪酶菌株在油脂降解中的应用,其特征在于,所述植物油与浓度为3~5wt%的PVA的体积比为1:3~6;所述超声乳化的时间为10~30min;所述乳化液与LB培养基的体积比为3:10~20;所述恒温培养的温度为28~35℃;所述恒温培养的时间为3~5d。

5.如权利要求2所述的高产脂肪酶菌株在油脂降解中的应用,其特征在于,将植物油和浓度为3~5wt%的PVA混合,超声乳化,制成乳化液,将乳化液和LB培养基混合,加入浓度为

10wt%罗丹明B制成罗丹明油脂平板,接种高产脂肪酶菌株Acinetobacter junii WCO‑9于油脂平板,恒温培养,实现油脂降解。

6.如权利要求5所述的高产脂肪酶菌株在油脂降解中的应用,其特征在于,所述植物油与浓度为3~5wt%的PVA的体积比为1:3~6;所述超声乳化的时间为10~30min;所述乳化液与LB培养基的体积比为3:10~20;所述浓度为10wt%罗丹明B与乳化液的体积比为1:120~180;所述恒温培养的温度为28~35℃;所述恒温培养的时间为3~5d。

7.一种如权利要求1所述的高产脂肪酶菌株在生产脂肪酶中的应用,其特征在于,该高产脂肪酶菌株对C10‑C18长链脂肪酸底物的活性在200~2000U/mL。

8.如权利要求7所述的高产脂肪酶菌株在生产脂肪酶中的应用,其特征在于,在长链脂肪酸底物溶液中加入Tris‑HCl缓冲液,混匀,然后加入高产脂肪酶菌株培养得到的粗酶液,

37℃水浴反应10~15min,加入浓度为10wt%的三氯乙酸终止反应,再加入浓度为10wt%的Na2CO3溶液显色,410nm测定光吸收值,利用对硝基苯酚法测定脂肪酶活性。

9.如权利要求8所述的高产脂肪酶菌株在生产脂肪酶中的应用,其特征在于,所述长链脂肪酸底物溶液与Tris‑HCl缓冲液的体积比为1:10~13;所述Tris‑HCl缓冲液的浓度为40~60mmol/L,pH为8.0;所述长链脂肪酸底物溶液与粗酶液的体积比为6~8:1;所述长链脂肪酸底物溶液与浓度为10wt%的三氯乙酸的体积比为1:2~4;所述长链脂肪酸底物溶液与浓度为10wt%的Na2CO3溶液的体积比为1:2~4。

10.如权利要求8所述的高产脂肪酶菌株在生产脂肪酶中的应用,其特征在于,所述粗酶液的生产方式为:将高产脂肪酶菌株划线活化,挑取单菌落于15~30mL LB液体培养基30℃,150~300r/min摇瓶培养12~24h制备种子液,种子液按0.5~2%接种量接种于含有30~60mL LB培养基的发酵瓶中,振荡培养36~72h;发酵液充分摇匀后6000~10000r/min离心3~8min取上清液即为粗酶液;

所述长链脂肪酸底物溶液的生产方法为:取长链脂肪酸底物加入异丙醇中,混匀,得到长链脂肪酸底物溶液;所述长链脂肪酸底物与异丙醇的质量体积比为1.5~4.5mg:1mL;所述长链脂肪酸底物为对硝基苯葵酸、月桂酸、豆蔻酸、硬脂酸、棕榈酸酯中的任意一种。