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专利号: 2018113149756
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种印迹脂肪酶,其特征在于所述印迹脂肪酶按如下方法制备:将印迹分子加入脂肪酶酶液中,搅拌溶解,调节pH为7.2-7.8,在25-50℃、100-160转/分钟条件下搅拌印迹反应完全后,加入大孔树脂,在20-40℃、60-120转/分钟条件下搅拌吸附完全后,将反应液过滤,滤饼洗涤干燥,即获得印迹脂肪酶;所述脂肪酶酶液为脂肪酶溶于pH7.4的缓冲液制成;

所述印迹分子为麦芽糖或蔗糖。

2.如权利要求1所述印迹脂肪酶,其特征在于所述脂肪酶酶液用量以脂肪酶重量计,所述印迹分子与脂肪酶重量比为0.1-0.4:1,所述大孔树脂与脂肪酶重量比为10-60:1。

3.如权利要求1所述印迹脂肪酶,其特征在于所述大孔树脂为D4006型大孔树脂、D3520型大孔树脂或D1300型大孔树脂。

4.如权利要求1或3所述印迹脂肪酶,其特征在于所述大孔树脂先进行预处理,方法:将大孔树脂以0.1g/ml的量加入体积浓度95%乙醇水溶液中,于室温、150r/min的条件下震荡洗涤24小时,并于中途两次更换等体积95%乙醇水溶液,震荡结束后,每次用树脂质量两倍的蒸馏水洗涤,洗五次,抽滤,即为预处理后的大孔树脂,洗涤用乙醇蒸馏回收。

5.如权利要求1所述印迹脂肪酶,其特征在于所述脂肪酶为黑曲霉脂肪酶或假丝酵母脂肪酶。

6.如权利要求1所述印迹脂肪酶,其特征在于所述脂肪酶酶液中缓冲液体积用量以脂肪酶质量计为15-30ml/g,所述缓冲液为0.05mol/L、pH7.4的磷酸钠缓冲液。

7.如权利要求1所述印迹脂肪酶,其特征在于所述干燥是在0.1大气压真空度45℃的真空干燥箱中干燥12h。

8.一种权利要求1所述印迹脂肪酶在催化低聚糖酯化中的应用。

9.如权利要求8所述的应用,其特征在于所述应用为催化蔗糖制备蔗糖-6-乙酯。

10.如权利要求9所述的应用,其特征在于所述的应用为:将蔗糖、乙酸乙烯酯、印迹脂肪酶、4A分子筛、叔戊醇和二甲基亚砜混匀,40℃和180r/min条件下振荡反应16h后,反应液分离纯化后,获得蔗糖-6-乙酯;所述蔗糖与乙酸乙烯酯物质的量之比为1:10,所述蔗糖与印迹脂肪酶重量比为1:9-15,所述蔗糖与4A分子筛重量比为1:9-10,所述叔戊醇和二甲基亚砜体积用量以蔗糖重量计分别为70-80ml/g和15-20ml/g。