1.一种Pirin同源蛋白的特征肽,其特征在于,所述特征肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:
1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4所示。
2.权利要求1所述的特征肽在Pirin同源蛋白的检测中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,通过液质联用检测方法对待测样品中所述特征肽的含量进行检测。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,Pirin同源蛋白的检测方法包括以下步骤:将待测样品进行酶解处理,得到酶解产物;
将所述酶解产物进行二甲基化衍生处理,得到二甲基化产物;
对所述二甲基化产物进行液质联用检测,分析其中所述特征肽的含量。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述酶解处理包括以下步骤:将待测样品加热以使蛋白变性,冷却后加入尿素进行反应,然后加入胰蛋白酶处理,所述胰蛋白酶与所述待测样品中蛋白质的质量比为1:(18~22)。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述二甲基化衍生处理包括以下步骤:将甲醛溶液和氰基硼氢化钠溶液混合,然后再与所述酶解产物混合,反应70~90分钟后终止反应。
7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,在所述二甲基化衍生处理之前还包括以下步骤:将所述酶解产物上样至C18固相萃取柱,加入含0.8wt%~1.2wt%甲酸和2wt%~
4wt%乙腈的水溶液进行清洗,然后加入含0.08wt%~0.12wt%甲酸、78wt%~82wt%乙腈的水溶液进行洗脱,收集洗脱液,得到纯化的酶解产物。
8.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述液质联用检测中液相色谱的条件为:色谱柱为Accucore Polar Premium C18,流动相A相为甲酸水溶液,流动相B相为甲酸乙腈溶液,流速为0.1mL/min~0.5mL/min,进样体积为1μL~5μL,洗脱方式为梯度洗脱。
9.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述液质联用检测中质谱的条件为:离子源为电喷雾离子源,雾化气流速为2.5L/min~3.5L/min,干燥气流速为8L/min~12L/min,脱溶剂管温度为240℃~260℃,加热模块温度为380℃~420℃,离子源接口电压为3.8kV~
4.2kV,扫描模式为多反应监测。
10.一种Pirin同源蛋白的检测试剂盒,其特征在于,包括酶解试剂和权利要求1所述的特征肽或内标肽,所述内标肽为权利要求1所述的特征肽经过同位素标记得到。