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专利号: 2021111435242
申请人: 丽江映华生物药业有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2025-06-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种醋酸泼尼松的发酵方法,其特征在于,所述发酵方法包括以下步骤:

一级发酵:将菌体悬浮液分别接种于一号种子罐和二号种子罐中培养形成一号菌丝体和二号菌丝体;

二级发酵:将一号菌丝体接种于发酵罐中培养15‑20h后,加入二号菌丝体继续培养16‑

22h,再补入种子液继续培养4h;

转化:向发酵罐中加入溶剂、醋酸可的松微粉搅拌后进行转化,转化完成后,升温采用乙酸乙酯提取浓缩液得到醋酸泼尼松。

2.根据权利要求1所述的醋酸泼尼松的发酵方法,其特征在于,所述孢子液按以下方法获得:

将简单节杆菌移植于斜面培养基,在28℃‑30℃的条件下培养5‑7天,孢子成熟;

将成熟后的简单节杆菌使用无菌生理盐水制成菌体悬浮液。

3.根据权利要求2所述的醋酸泼尼松的发酵方法,其特征在于,斜面培养基的成分为葡萄糖1.6%‑1.8%、酵母浸膏1.5‑1.8%、琼脂1%‑1.5%和余量的水。

4.根据权利要求1所述的醋酸泼尼松的发酵方法,其特征在于,所述一号种子罐中培养条件为:27℃培养40h,罐压为0.01‑0.02MPa,搅拌转速为320‑

360r/min;

所述二号种子罐中培养条件为:二号种子罐中25℃培养40‑50h,罐压为0.01‑0.02MPa,搅拌转速为320‑360r/min。

5.根据权利要求4所述的醋酸泼尼松的发酵方法,其特征在于,所述一号种子罐和二号种子罐中的种子液组分相同,包括:葡萄糖2.0%‑2.2%、棉子粉0.8%‑1%、青刺果粉0.8%‑1%、酵母浸膏0.8%‑1.2%、磷酸二氢钠0.1%和余量的水。

6.根据权利要求1所述的醋酸泼尼松的发酵方法,其特征在于,所述二级发酵中发酵液的组分和种子液组分相同。

7.根据权利要求5或6所述的醋酸泼尼松的发酵方法,其特征在于,所述种子液和发酵液的灭菌温度为118℃‑123℃。

8.根据权利要求1所述的醋酸泼尼松的发酵方法,其特征在于,所述溶剂为甲醇、乙腈、乙醇和丙酮中的一种或几种混合。

9.根据权利要求1所述的醋酸泼尼松的发酵方法,其特征在于,二级发酵过程中发酵过程优选为:26℃一号菌丝体培养15h时,补入二号菌丝体培养

16h时,加入未接种孢子的种子液,继续培养4h,搅拌转速为280r/min。