1.基于石墨烯磁性纳米材料的电化学免疫传感器在非疾病诊断目的的免疫蛋白的超灵敏检测中的应用,其特征在于,基于石墨烯磁性纳米材料的电化学免疫传感器按照如下步骤制备:(1)将金电极进行清洗处理;
(2)基于石墨烯磁性纳米材料的电化学免疫传感器的制备:将Graphene/Fe3O4纳米复合材料修饰至金电极表面,室温下晾干成膜得到修饰电极,将修饰电极依次浸泡于纳米金溶‑1胶4‑6h、0.01~100ng·mL 的甲胎蛋白抗体溶液9‑12h、0.25wt%的牛血清白蛋白溶液30‑
45min,得到基于石墨烯磁性纳米材料的电化学免疫传感器;
所述免疫蛋白包括甲种胎儿球蛋白、癌胚抗原;
所述免疫蛋白检测的具体步骤为:
(1)孵育:将基于石墨烯磁性纳米材料的电化学免疫传感器置于不同的浓度的免疫蛋白抗原溶液中进行特异性反应;
(2)检测电化学免疫传感器的电信号:
将饱和Ag/AgCl电极作为参比电极,铂丝电极为对电极,与孵育后的基于石墨烯磁性纳米材料的电化学免疫传感器为工作电极组成三电极体系,连接到光电化学检测设备上,以‑1K3[Fe(CN)6]+K4[Fe(CN)6]+0.1mol·L KCl溶液为电解液,K3[Fe(CN)6]+K4[Fe(CN)6]为
5mmol/L,电解液的pH为5‑9,采用循环伏安法,根据电流‑电势绘制工作曲线;
Graphene/Fe3O4纳米复合材料均按照如下步骤制得:
将100g氧化石墨烯加入至100mL超纯水中得到1mg/mL溶液,超声分散3h后,将1.16g的FeSO4·7H2O加入到氧化石墨烯溶液中,滴加体积分数为28wt%的NH3·H2O溶液至pH达到9‑
11;常温搅拌2h后于80℃继续反应1h,经磁分离、洗涤、常温干燥得到Graphene/Fe3O4纳米复合材料。
2.根据权利要求1所述的基于石墨烯磁性纳米材料的电化学免疫传感器在非疾病诊断目的的免疫蛋白的超灵敏检测中的应用,其特征在于,所述步骤(1)中金电极的清洗处理方法为:将金电极依次经粒径分别为0.03μm、0.05μm的Al2O3糊打磨后用超纯水冲洗干净,再依次于超纯水、乙醇、超纯水中超声洗涤5min,清洗后的电极置于室温下晾干。
3.根据权利要求1所述的基于石墨烯磁性纳米材料的电化学免疫传感器在非疾病诊断目的的免疫蛋白的超灵敏检测中的应用,其特征在于,所述步骤(2)中修饰的方法为:将Graphene/Fe3O4纳米复合材料浸泡或滴涂至金电极表面。
4.根据权利要求1所述的基于石墨烯磁性纳米材料的电化学免疫传感器在非疾病诊断目的的免疫蛋白的超灵敏检测中的应用,其特征在于,所述电解液的pH为8‑9,所述孵育时间为20‑30min,所述孵育温度为20‑30℃。
5.根据权利要求1所述的基于石墨烯磁性纳米材料的电化学免疫传感器在非疾病诊断目的的免疫蛋白的超灵敏检测中的应用,其特征在于,所述电解液的pH为8,所述孵育时间为20min,所述孵育温度为25℃。
6.根据权利要求1所述的基于石墨烯磁性纳米材料的电化学免疫传感器在非疾病诊断目的的免疫蛋白的超灵敏检测中的应用,其特征在于,所述免疫蛋白抗原溶液的浓度为‑1
0.003‑100ng·mL 。