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专利号: 2021105865953
申请人: 山西医科大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种鉴定血痕遗留时间的microRNA组合,其特征在于,包括:hsa‑miR106b‑5p、hsa‑miR155‑5p、hsa‑miR16‑5p、hsa‑miR140‑5p、hsa‑miR423‑3p、hsa‑miR423‑5p、hsa‑miR93‑

5p、hsa‑miR222‑3p、hsa‑miR483‑3p、hsa‑miR139‑5p、hsa‑miR142‑5P。

2.根据权利要求1所述的microRNA组合,其特征在于,所述的microRNA组合中还包括内参基因hsa‑miR191‑5p。

3.一种鉴定血痕遗留时间的方法,其特征在于,通过检测权利要求1‑2任一项所述的microRNA组合中各个microRNA的相对表达量推测血痕遗留时间进行鉴定;所述的方法包括通过SYBRGreen荧光实时定量PCR技术检测目标分子在样本中的相对表达量。

4.根据权利要求3所述的鉴定血痕遗留时间的方法,其特征在于,通过Orange:Data Mining Toolbox in Python中的Naive Bayes模型进行血痕遗留时间鉴定模型的构建。

5.根据权利要求3‑4任一项所述的鉴定血痕遗留时间的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)提取样本RNA;

(2)样本RNA逆转录为cDNA;

(3)以cDNA为模板分别对microRNA进行扩增;

‑△△CT

(4)以miR191‑5p作为内参使用2 法进行相对表达量的计算;

(5)使用Orange:Data Mining Toolbox in Python中的Naive Bayes模型根据步骤(4)计算出的相对表达量对血痕遗留时间进行预测。

6.根据权利要求5所述的鉴定血痕遗留时间的方法,其特征在于,所述的步骤(3)中的扩增正向引物如下:

7.权利要求1‑2任一项所述的microRNA组合和/或权利要求3‑6任一项所述的鉴定血痕遗留时间的方法在制备鉴定血痕遗留时间的试剂和/或试剂盒中的应用。

8.一种鉴定血痕遗留时间的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒中包括用于检测权利要求1‑2任一项所述的microRNA表达量的检测试剂。

9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述的检测试剂包括用于扩增权利要求

1‑2任一项所述的microRNA的正反向引物;所述的正向引物序列如下:MiRNA 正向引物

hsa‑miR222‑3p SEQ ID NO.1hsa‑miR423‑5p SEQ ID NO.2hsa‑miR423‑3p SEQ ID NO.3hsa‑miR191‑5p SEQ ID NO.4hsa‑miR16‑5p SEQ ID NO.5hsa‑miR93‑5p SEQ ID NO.6hsa‑miR140‑5p SEQ ID NO.7hsa‑miR106b‑5p SEQ ID NO.8hsa‑miR155‑5P SEQ ID NO.9hsa‑miR139‑5P SEQ ID NO.10hsa‑miR483‑3p SEQ ID NO.11hsa‑miR142‑5P SEQ ID NO.12

10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒中还包括酶、缓冲液。