1.一种花生果腐病菌的致病性鉴定方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)花生果腐病菌的分离:从田间采集带果腐病的花生荚果,对病原菌株进行分离纯化;
(2)果腐病病原真菌的培养:分离的菌株于PDA平板上进行25℃黑暗培养,3天后于菌落边缘新鲜区域切取4*4mm大小的菌丝块,用于接菌于花生材料上进行致病性测定;
(3)用于接菌的花生植物材料的制备:准备无病斑的去壳花生仁,消毒后转移至无菌水中进行浸泡处理36小时,然后去皮,将花生仁的两片子叶分开,把两片子叶间生长点切除,保留子叶,每片子叶为一个接种材料;
(4)接菌:浸泡后的花生仁子叶整齐摆放于垫有吸水纸并且加水保湿的托盘中,水量没过供试花生接种材料的一半;对每个花生仁子叶表面进行创伤,将菌丝面贴于创伤处;托盘盖上保鲜膜进行保湿,置于25℃黑暗培养;
(5)判定致病力强弱:侵染致病情况统计,根据发病严重度和发病率,判定致病力强弱。
2.根据权利要求1所述的花生果腐病菌的致病性鉴定方法,其特征在于,对病原菌株进行分离纯化的具体步骤为:清水洗净果荚,将病健交界处的花生果壳切成3*3mm的小块,进行表面消毒后置于PDA平板上25℃培养2‑3天,挑取菌落新鲜尖端转接于新的PDA平板上,获得纯培养后,挑取菌丝破碎提取DNA,利用真菌ITS区通用引物ITS1/ITS4进行PCR扩增,测序后在GenBank进行比对,鉴定分离菌株。
3.根据权利要求1所述的花生果腐病菌的致病性鉴定方法,其特征在于,步骤(3)中花生仁消毒的方法为采用75%乙醇表面消毒30s,10%次氯酸钠表面消毒3‑5min,用无菌水冲洗
4次。
4.根据权利要求1所述的花生果腐病菌的致病性鉴定方法,其特征在于,步骤(4)中对每个花生仁子叶表面进行创伤处理的方法为:用手术刀在接种材料中心位置划一道5mm伤口。
5.根据权利要求1所述的花生果腐病菌的致病性鉴定方法,其特征在于,花生果腐病严重度分级标准为:
0级:不发病;
1级:接种部位产生病斑,病斑大小不超过子叶面积的1/4;
3级:病斑大小为子叶面积的1/4‑1/2;
5级:病斑大小超过子叶面积的1/2;
7级:整片子叶发病。