1.一种一步法荧光检测体系,其特征是,包括,底物和模板:底物和模板均为单链DNA,底物含有8‑氧鸟嘌呤,底物的3’端用NH2修饰;模板由至少一条DNA1和至少一条DNA2交错连接形成,DNA1与DNA2中均不含腺嘌呤,DNA1与DNA2的连接处含有腺嘌呤脱氧核苷酸;底物与DNA1、一部分DNA2互补,与8‑氧鸟嘌呤互补的胞嘧啶位于DNA1;
所述底物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述模板的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;
APE1酶:用于切割AP位点;
DNA聚合酶和dNTP/dUTP混合物:用于在切除AP位点后3’OH端进行延伸反应,dNTP中不含dTTP;
UDG酶:用于清除延伸反应获得延伸产物中的尿嘧啶;
荧光染料:用于与扩增产物产生荧光。
2.如权利要求1所述的一步法荧光检测体系,其特征是,所述DNA聚合酶为Klenow大片段聚合酶;
或,荧光染料为SYBR Green II。
3.如权利要求1所述的一步法荧光检测体系,其特征是,底物的浓度为10nM时,模板的浓度为14~16nM;
‑4
或,底物的量为2×10 nmol时,APE1酶的用量为0.75~0.85U;
‑4
或,底物的量为2×10 nmol时,UDG酶的用量不低于2U;
‑4
或,底物的量为2×10 nmol时,Klenow大片段聚合酶的用量为1.9~2.1U;
或,底物的浓度为10nM时,dNTP/dUTP混合物的浓度为58~62μM。
4.如权利要求3所述的一步法荧光检测体系,其特征是,所述UDG酶的用量为2.0~
2.2U。
5.一种DNA糖基化酶活性的检测试剂盒,其特征是,包括权利要求1~4任一所述的一步法荧光检测体系、缓冲溶液。
6.一种权利要求1~4任一所述的一步法荧光检测体系在筛选hOGG1抑制剂中的应用。
7.一种权利要求1~4任一所述的一步法荧光检测体系在制备检测癌细胞试剂中的应用。
8.如权利要求7所述的应用,其特征是,所述癌细胞为A549细胞和/或HeLa细胞。