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专利号: 2021101879088
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种羧酯酶在动力学拆分环己烯甲酸酯生产环己烯甲酸中的应用,其特征在于,所述的羧酯酶是如下(a)或(b)的羧酯酶:(a)氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的羧酯酶;

(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有羧酯酶活性的由(a)衍生的羧酯酶。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的羧酯酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,编码所述的羧酯酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示。

4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的环己烯甲酸酯的结构式如下所示:其中,R为甲基、乙基、异丙基或丁基。

5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的应用具体是在磷酸盐缓冲液中,在所述的羧酯酶的催化下,利用环己烯甲酸酯进行不对称拆分反应,形成光学活性环己烯甲酸。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,在所述的应用中,环己烯甲酸酯在反应液中的浓度为1~5000mmol/L,羧酯酶的用量为0.01~120kU/L。

7.一种羧酯酶突变体,其特征在于,所述的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

8.一种编码权利要求7所述的羧酯酶突变体的基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

9.一种携带权利要求8所述基因的表达载体。

10.一种表达权利要求7所述的羧酯酶突变体的重组菌。