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专利号: 2020112135912
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.黄酮3β-羟化酶还原酶辅酶突变体,其特征在于,以氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酶为亲本,将亲本第626和641位同时突变,或是将亲本第453位的氨基酸突变。

2.根据权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述突变体是将亲本第626位氨基酸突变为天冬酰胺并将第641位的氨基酸突变为天冬氨酸;或是将亲本的第453位突变为缬氨酸。

3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的表达载体。

5.表达权利要求1或2所述突变体,或含有权利要求3所述基因的微生物细胞。

6.一种微生物细胞,其特征在于,在权利要求5所述微生物细胞中表达黄酮3β-羟化酶还原酶。

7.一种全细胞转化生产圣草酚的方法,其特征在于,以柚皮素为底物,在反应体系中加入权利要求6所述微生物细胞。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,将所述微生物细胞在25-32℃,200-250rpm培养16-18h,获得种子液,将种子液以1-5mL/100mL的量加入反应体系中。

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,每隔10-12小时向反应体系中补加柚皮素,反应70-80小时。

10.权利要求1或2所述突变体,或权利要求3所述基因,或权利要求4所述表达载体,或权利要求5或6所述微生物细胞在生产圣草酚中的应用。