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专利号: 2020108790973
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2023-12-04
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种美藤果免疫活性肽,其特征在于,包括:TGGWSPLK、WKPW、FLTMEPR、VVLDVK、KVVL、MVVKK、LTGLNKL、RLLVWELER、KLSLEWWLK、FVKLL、LGDLGTKL、LTGLDKL、LFAEMDK、EADGTLR、VVLFK、TLLNPR、AYLTGLK、WLPDVK、VLWLPR、RWQVWEDR、TVLLPR、LVRFPK、TLLFGDK、WSELVK24条肽段;

美藤果免疫活性肽的制备方法,包括:对美藤果粕进行粉碎以获得美藤果粕粉;

取所述美藤果粕粉置于超临界萃取设备的24L提取釜中,在20MPa、32℃的条件下萃取

120min,其中,CO2的流速为60mL/min;

弃去萃取出的美藤果油,取出美藤果饼粕粉,加入一定量一级水,超声处理15min,恒温搅拌提取一定时间,以4000转每分钟的速度离心10min分离得上清液;

将所述上清液置于蒸馏水中、温度为4℃的条件下透析72小时,并于旋转蒸发器中旋转蒸发一定时间,经过真空冷冻干燥获得冻干的清蛋白;

对所述清蛋白进行水解以获得清蛋白水解液;

对所述清蛋白水解液进行超滤处理和分离纯化处理;

收集多肽溶液;

所述清蛋白的提取条件为:料液比为1:25g/mL、提取温度为40℃、提取时间为5h;

利用胰蛋白酶对所述清蛋白进行水解;

采用胰蛋白酶进行水解时的水解条件为:加酶量为7000U/g、反应pH为7.0、酶解温度为

50℃、酶解时间为4h;

采用分子量为3kDa的超滤膜对所述清蛋白水解液进行超滤处理;

对超滤处理后分子量小于3kDa的清蛋白水解液超声处理15min后进行分离纯化处理,用流速为3mL/min的蒸馏水洗脱,收集13min‑29min洗脱出来的多肽溶液;

对收集到的多肽溶液进行浓缩;

采用Sephadex G‑25葡聚糖凝胶柱对所述清蛋白水解液进行分离纯化处理;

在超滤处理过程中用氮气进行加压,使压力保持在0.2MPa,并将获得的多肽溶液置于冰面上以保证其活性。