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专利号: 2020106301544
申请人: 宁波大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-03-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.基于交流阻抗技术的末端转移酶活性动态分析方法构建及应用,其特征在于,机理如下:本发明是基于交流阻抗技术的一种新型TdT电化学方法,利用TdT工具酶作用,将三磷酸胞嘧啶核苷(dCTP)不断添加到巯基DNA 3’-OH端,形成富C DNA长链。当pH为7.0时,由于DNA长链形成对[Fe(CN)6]3-/4-排斥作用增加,得到一个较大阻抗值;当pH为5.8时,由于DNA长链部分质子化导致i-motif形成,对[Fe(CN)6]3-/4-排斥作用减小有利于电极表面电子传递,得到一个较小阻抗值,构建了一种简单、快速、无损伤、无标记的TdT活性动态分析方法。

2.基于交流阻抗技术的末端转移酶活性动态分析方法构建及应用,其特征在于:本发明将Electrode 3置于10mM磷酸缓冲溶液(PB,Na2HPO4/NaH2PO4)(pH 7.0或5.8)孵育30min,再转移到5mM[Fe(CN)6]3-/4-中进行EIS测量。

3.基于交流阻抗技术的末端转移酶活性动态分析方法构建及应用,其特征在于:随着

10mM PB溶液pH从7.0变化到5.8,阻抗有一个减小的进程,而从5.8变化到7.0,阻抗有一个增加的进程,这样反复操作可形成一种信号开关,进而实现TdT活性及其相关微环境的动态分析。

4.基于交流阻抗技术的末端转移酶活性动态分析方法构建及应用,其特征在于:该传感器对TdT活性分析具有高选择性和高灵敏度,检测限为2.1×10-5U/mL、1.8×10-5U/mL;该传感器对小分子抑制剂(焦磷酸钠)的IC50为39.7μM、30.1μM。