1.富含DHA藻油的生产、提取以及纯化工艺,其特征在于,所述方法包括如下步骤:步骤1)种子培养:将斜面保藏的隐甲藻活化,然后接入装有500mL摇瓶种子培养基的2L的培养瓶中进行摇瓶种子培养,以120rpm转速、25℃培养48h,然后按照3-5%的接种量接种到种子罐培养基中进行培养,培养条件为:180rpm、25℃、通气量0.5-1vvm,培养48-72h,得到隐甲藻种子液;
步骤2)发酵:将隐甲藻种子液按照3-5%的接种量接种到含有发酵培养液的反应池中,
25℃培养,通气速率为1-2vvm;培养至72h时,往发酵培养液中添加花生四烯酸和没食子酸丙酯,继续培养48-72h;整个发酵培养过程中通过添加流加葡萄糖控制葡萄糖浓度不低于
1g/L,通过流加氨水控制pH在6.5-7.5;
步骤3)提取粗油脂:收集藻液, 4000r/min离心10min,沉淀用蒸馏水清洗3次, 50℃真空干燥,将藻细胞粉碎,然后添加到氯仿甲醇混合溶液中,添加量为1g粉末:3ml氯仿甲醇混合溶液,微波提取,微波功率为200W,提取时间为60min,提取温度为50℃,然后进行超声提取,提取温度为60℃,超声功率为200W,提取时间为60min,再进行离心,收集氯仿相,置于氮气中吹干,并且真空干燥,得到粗油脂;
步骤4)纯化:将粗油脂经过阳离子交换树脂进行离子交换,然后加入1-2wt%的活性炭,在氮气保护下,100-200rpm搅拌脱色30-60min,将脱色后的油脂通过500-1000目的过滤膜进行过滤,收集滤过液,即得。
2.根据权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述步骤2)中,花生四烯酸的添加量为40-
80mg/L。
3.根据权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述步骤2)中,没食子酸丙酯的添加量为
10-20mg/L。
4.根据权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述摇瓶种子培养基和种子罐培养基的组分均为:葡萄糖10g/L,氯化钠5g/L,硫酸铵2g/L,氯化镁0.1g/L,磷酸二氢钾0.1g/L。
5.根据权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述发酵培养液的组分为:葡萄糖20g/L,糖蜜20g/L,氯化钠8g/L,硫酸铵5g/L,硝酸钾2g/L,氯化镁0.2g/L,磷酸二氢钾0.2g/L,硅酸钠0.1g/L,吲哚乙酸10mg/L,赤霉素10mg/L。
6.根据权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述氯仿甲醇混合溶液由氯仿和甲醇按照体积比为2:1混合制得。
7.按照权利要求1-6任其一所述工艺制备的藻油。