1.一种从生物膜反应器活性污泥中富集分离高效聚磷菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取运行状态良好的生物膜反应器活性污泥,涡旋、离心后弃上清,对离心后沉淀再涡旋,得预处理污泥;
(2)在厌氧状态下,将所述预处理污泥接种到厌氧液体培养基中静置24h,离心弃上清;
将离心后的沉淀接种于好氧液体培养基中,有氧培养23h后,静置1h;
所述厌氧液体培养基中包括以下浓度的成分:2~5g/L的NaAC、135~145mg/L的(NH4)
2SO4、12~16mg/L的CaCl2·2H2O、175~185mg/L的MgSO4·7H2O、0.3~0.5mL/L的微量元素液和0.5~1mL/L的维生素液;
所述好氧液体培养基中包括以下浓度的成分:135~145mg/L的KH2PO4、240~250mg/L的K2HPO4、135~145mg/L的(NH4)2SO4、12~16mg/L的CaCl2·2H2O、175~185mg/L的MgSO4·
7H2O、0.3~0.5mL/L的微量元素液和0.5~1mL/L的维生素液;
(3)重复步骤(2)至好氧吸磷量/厌氧释磷量比值下降时,停止循环,得体外富集驯化菌液;其中:厌氧释磷量=厌氧初期磷含量-厌氧末期磷含量式Ⅰ;
好氧吸磷量=好氧末期磷含量-好氧初期磷含量式Ⅱ;
(4)将所述体外富集驯化菌液离心后弃上清,利用生理盐水将离心后的菌体沉淀稀释,取OD600值为0.1~0.5之间的稀释液接种于固体分离培养基上培养2~3d,挑取菌落形态特征有明显差异并且变蓝的单菌落,重复在所述固体分离培养基上进行四区划线,收集所述固体分离培养基上形态一致的菌体,得高效聚磷菌;
所述固体分离培养基中含有BCIP显色液,还包括以下浓度的成分:2~3g/L的NaAC、
180mg/L的KH2PO4、320mg/L的K2HPO4、1.4~1.6g/L的(NH4)2SO4、150mg/L的CaCl2·2H2O、
1.7g/L的MgSO4·7H2O、3~5mL/L的微量元素液、10mL/L的维生素液和15g/L的琼脂。
2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(1)所述离心的转速为12000rpm,所述离心的时间为30s。
3.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(2)所述离心的转速为6000rpm,所述离心的时间为20min。
4.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(2)所述有氧培养在摇床上进行,所述摇床的转速为150rpm,所述有氧培养的温度为30±0.5℃。
5.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(4)所述离心的转速为10000rpm,所述离心的时间为10min。
6.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(4)中利用生理盐水将离心后的菌体沉淀稀释成10-1~10-7倍。
7.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(2)和步骤(4)中所述微量元素液包括以下浓度的成分:1.4~1.6g/L的FeCl3·6H2O、0.14~0.16g/L的H3BO3,0.03~0.05g/L的CuSO4·5H2O、0.17~0.19g/L的KI、0.12~0.14g/L的MnCl2·4H2O、0.05~0.07g/L的Na2MO4·2H2O、0.11~0.13g/L的ZnSO4·7H2O和0.14~0.16g/L的CoCl2·6H2O。
8.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(2)和步骤(4)中所述维生素液包括以下浓度的成分:50~52mg/L的维生素B1、50~55mg/L的维生素B2、90~100mg/L的维生素B6、2~3g/L的维生素B12、8~10mg/L的叶酸、50~55mg/L的烟酸、50~55mg/L的泛酸钙、50~
55mg/L的对氨基苯甲酸和20~21mg/L的生物素。
9.根据权利要求1所述方法,其特征在于,在步骤(4)得到高效聚磷菌后,还包括对所述高效聚磷菌进行好氧Poly-P和厌氧PHA染色。
10.根据权利要求9所述方法,其特征在于,经过好氧Poly-P和厌氧PHA染色验证后的高效聚磷菌,还包括菌种保存,所述菌种保存为在固体LB培养基上进行。