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专利号: 2020101416467
申请人: 泰州学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2025-02-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种酶法合成西那卡塞中间体(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法,其特征在于:包括,在pH6.5~8.5的磷酸钾缓冲液中,分别添加1-萘乙酮、氨基供体、辅酶、助溶剂、甲酸脱氢酶以及D-氨基酸脱氢酶组成反应混合液,在30~40℃下进行反应24~48h,生成(R)-1-(1-萘基)乙胺;其中,所述D-氨基酸脱氢酶,其基因序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID No.2所示;

所述反应混合液中1-萘乙酮浓度为50~300mmol/L,氨基供体的浓度为100~600mmol/L,辅酶浓度为0.1~0.5g/L,助溶剂浓度为5%~10%,辅酶循环酶浓度为1~3g/L,D-氨基酸脱氢酶浓度为0.5~2g/L,磷酸钾缓冲液的浓度为50~100mmol/L。

2.如权利要求1所述酶法合成西那卡塞中间体(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法,其特征在于:所述氨基供体为无机铵盐。

3.如权利要求1所述酶法合成西那卡塞中间体(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法,其特征在于:所述无机铵盐包括甲酸铵。

4.如权利要求1所述酶法合成西那卡塞中间体(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法,其特征在于:所述辅酶为NAD+、NADP+、NADH、NADPH中任意一种或几种的组合。

5.如权利要求4所述酶法合成西那卡塞中间体(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法,其特征在于:所述辅酶为NAD+。

6.如权利要求1所述酶法合成西那卡塞中间体(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法,其特征在于:所述助溶剂为二甲基亚砜、异丙醇、四氢呋喃的任意一种或几种的组合。

7.如权利要求6所述酶法合成西那卡塞中间体(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法,其特征在于:所述助溶剂为二甲基亚砜。

8.如权利要求1~7中任一所述酶法合成西那卡塞中间体(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法,其特征在于:所述反应混合液中1-萘乙酮浓度为300mmol/L,甲酸铵浓度为600mmol/L,辅酶NAD+浓度为0.5g/L,二甲基亚砜的浓度为10%,缓冲液浓度为100mmol/L,甲酸脱氢酶浓度为3g/L,D-氨基酸脱氢酶浓度为2g/L。