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专利号: 2020100147105
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种D-甘油醛的生产方法,其特征在于:通过糖醇氧化酶AldO将甘油转化为D-甘油醛,所述糖醇氧化酶AldO,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.如权利要求1所述的D-甘油醛的生产方法,其特征在于:包括,将重组质粒pET28a-AldO转化到Rosetta(DE3)感受态细胞,制备得到AldO的表达菌株。

3.如权利要求2所述的D-甘油醛的生产方法,其特征在于:还包括,在含卡那霉素的LB培养基平板上划线,次日挑取单菌落接种于5mL含卡那霉素的LB培养基,37℃,200rpm过夜培养,以1%的接种量接入50mL LB培养基中,37℃,200rpm继续培养2~3h;待培养物OD600=0.6~0.8时,加入IPTG,使其终浓度为0.1mmol/L,16℃,200rpm过夜培养,6000rpm离心收集菌体,用0.85%的氯化钠溶液洗涤,用5mL无菌水重悬菌体,超声破碎,12000rpm离心收集上清液,用镍柱进行纯化。

4.如权利要求3所述的D-甘油醛的生产方法,其特征在于:所述卡那霉素终浓度为50μg/mL。

5.如权利要求1所述的D-甘油醛的生产方法,其特征在于:所述糖醇氧化酶AldO,其适宜反应温度为25~45℃。

6.如权利要求5所述的D-甘油醛的生产方法,其特征在于:所述糖醇氧化酶AldO,其最适反应温度为30~40℃。

7.如权利要求6所述的D-甘油醛的生产方法,其特征在于:所述糖醇氧化酶AldO,其最适反应温度为35℃。

8.如权利要求1所述的D-甘油醛的生产方法,其特征在于:所述糖醇氧化酶AldO,其其适宜反应pH值为7.0~8.0。

9.如权利要求8所述的D-甘油醛的生产方法,其特征在于:所述糖醇氧化酶AldO,其其适宜反应pH值为7.5。