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专利号: 2019113765146
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于,所述重组谷氨酸棒杆菌以谷氨酸棒杆菌为宿主,敲除编码N-乙酰谷氨酸激酶的基因,且表达编码谷氨酸脱羧酶的基因和编码β-丙氨酸CoA转移酶的基因;所述编码β-丙氨酸CoA转移酶的基因的上游连接有核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的调控基因。

2.如权利要求1所述的一种重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于,所述编码N-乙酰谷氨酸激酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.如权利要求1或2所述的一种重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于,所述编码谷氨酸脱羧酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。

4.如权利要求1-3任一所述的一种重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于,所述编码β-丙氨酸CoA转移酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。

5.如权利要求1-4任一所述的一种重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于,所述重组谷氨酸棒杆菌以谷氨酸棒杆菌为宿主,敲除编码N-乙酰谷氨酸激酶基因,且以pET-28a(+)质粒、pXMJ19质粒、pET-24b(+)质粒和/或pDXW-10质粒为载体表达编码谷氨酸脱羧酶的基因和编码β-丙氨酸CoA转移酶的基因。

6.一种生产2-吡咯烷酮的方法,其特征在于,所述方法为先将权利要求1-5任一所述的重组谷氨酸棒杆菌接种至含有葡萄糖的的培养基中,于温度为28~35℃、转速为100~

250rpm、pH为6~8的条件下进行发酵,获得含有2-吡咯烷酮的发酵液,然后将含有2-吡咯烷酮的发酵液进行提取,获得2-吡咯烷酮。

7.一段调控基因,其特征在于,所述调控基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

8.一种重组质粒,其特征在于,所述重组质粒携带权利要求7所述的调控基因以及目的基因。

9.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞携带权利要求7所述的调控基因以及目的基因,或者,所述宿主细胞携带权利要求8所述的重组质粒。

10.权利要求1-5任一所述的重组谷氨酸棒杆菌或权利要求6所述的方法或权利要求7所述的调控基因或权利要求8所述的重组质粒或权利要求9所述的宿主细胞在生产2-吡咯烷酮中的应用。