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专利号: 2019112509903
申请人: 长沙学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种从淤泥中筛选裂解红球藻的粘细菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、将灭活红球藻滴加在Wax固体培养基上,在灭活红球藻周围加入经预处理的淤泥进行培养,形成子实体;所述淤泥的预处理方法为:将淤泥与抗生素混合液、放线菌酮溶液混合,所得混合物于55℃水浴下静置10min,在常温条件下放置12小时,完成对淤泥的预处理;

所述淤泥与抗生素混合液、放线菌酮溶液的比例为1g∶3mL∶1mL;所述抗生素混合液是由卡那霉素和氨苄青霉素溶于水制得;所述抗生素混合液中,卡那霉素的浓度为8mg/mL,氨苄青霉素的浓度为30mg/mL;所述放线菌酮溶液由放线菌酮溶解于二甲基亚砜中制得;所述放线菌酮溶液中放线菌酮的浓度为15mg/mL;

S2、对步骤S1中得到的子实体进行纯化培养,得到裂解红球藻的粘细菌。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤S1中,所述灭活红球藻由以下方法获得:

(1)将红球藻藻种接种于BBM培养基中,得到原藻液;

(2)将步骤(1)得到的原藻液接入到BBM培养基中进行培养,直至达到对数生长期;

(3)采用200μmol/m2·s的强光对步骤(2)中培养得到的红球藻进行诱导,使红球藻由绿变红,去除培养基,所得红球藻用121℃的高压蒸汽灭菌,得到灭活红球藻。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,所述红球藻藻种的接种量为1%;

所述步骤(2)中,所述原藻液与BBM培养基的体积比为1∶2;所述培养的条件为:温度23±0.5℃,光照强度40μmol/m2·s,光周期12∶12,培养时间为6天;

所述步骤(3)中,所述诱导的时间为6天;所述灭菌的时间为30min。

4.根据权利要求1~3中任一项所述的方法,其特征在于,所述步骤S1中,所述培养在温度为30℃下进行;所述培养的时间为10天;所述Wax固体培养基中还含有放线菌酮,浓度为

20μg/mL。

5.根据权利要求1~3中任一项所述的方法,其特征在于,所述步骤S2具体为:S2-1、将子实体接入Wax固体培养基上进行培养;

S2-2、将经步骤S2-1中经Wax固体培养基培养后得到的细菌转接入Rich液体培养基中进行培养,得到裂解红球藻的粘细菌。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述步骤S2-1中,所述培养至少进行转接培养两次;所述培养在温度为30℃下进行,单次培养的时间为5天;所述Wax固体培养基中还含有放线菌酮,浓度为20μg/mL。

7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述步骤S2-2中,所述Rich液体培养基置于恒温摇床上,恒温摇床的温度为30℃,恒温摇床的转速为150r/min;所述培养的时间为7天。