1.一种从九香虫中同时制备五种多巴胺类化合物的分离方法,其特征在于:它包括如下步骤:
步骤一:以干燥的九香虫药材为原料,粉碎成1-5mm的粗粉,按照重量比例加入2-10倍的70%乙醇溶液,超声提取3次,提取时间分别为60min、45min、30min,合并提取液,过滤、60℃真空浓缩至无醇度,得九香虫提取浓缩液;
步骤二:往步骤一浓缩液中依次加入石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,每个溶剂萃取3次,每次体积为溶液体积的1/3-2/3,收集、合并正丁醇萃取液,60℃真空浓缩至1/10体积;
步骤三:按照重量比,给步骤二浓缩液中加入1-3倍100-300目硅胶拌样,进行硅胶柱层析,氯仿-甲醇梯度洗脱,收集1/5-1/1洗脱馏分,60℃真空浓缩至1/10-1/5体积,得到待制备溶液;
步骤四:将步骤三所得到的待制备溶液用0.45μm有机膜过滤,收集滤液,然后滤液进样,进行九香虫5种单体化合物的制备分离,并针对性的收集纯度大于98.0%的各个单体的制备馏分溶液;在此过程中,紫外检测器设置波长为280nm,进行在线检测;
步骤五:将步骤(4)中进行高效制备液相色谱分离得到的5种制备馏分溶液,分别60℃真空浓缩至干,回收甲醇溶剂,固体放置于65℃干燥箱干燥12小时,即得到(1)N-[2-(3,4-Dihydroxyphenyl)-2-hydroxyethyl] acetamide;
(2)N-[(E)-2-(3,4-Dihydroxyphenyl)vinyl]acetamide;
(3)trans-2-(3',4'-Dihydroxyphenyl)-3-acetylamino-7-hydroxyethyl-1,4-benzodioxane;
(4)trans-2-(3',4'-Dihydroxyphenyl)-3-acetylamino-6-hydroxyethyl-1,4-benzodioxane;
(5)trans-2-(3',4'-Dihydroxyphenyl)-3-acetylamino-7-(N-acetyl-2''-aminoethyl-ene)1,4-benzodioxane;五种高纯度化合物单体。
2.根据权利要求1所述的一种从九香虫中同时制备五种多巴胺类化合物的分离方法,其特征在于:所述步骤四中,制备液相色谱条件为:色谱柱直径为:50mm,色谱柱填料为C18填料,粒径为10μm,柱温为室温,流动相为甲醇-0.1%乙酸水溶液,且两者的体积比为40:60,流速为60ml/min,检测波长为280nm。
3.根据权利要求1所述的一种从九香虫中同时制备五种多巴胺类化合物的分离方法,其特征在于:所述五种单体化合物产品的纯度复检采用反相分析型高效液相色谱,色谱条件为:以C18为填料,粒径为5μm,甲醇-0.1%乙酸水溶液为流动相,两者体积比为40:60,流速
1.0ml/min,检测波长280nm。
4.根据权利要求1所述的一种从九香虫中同时制备5种多巴胺类化合物的分离方法,其特征在于:所述五种单体化合物产品同时分离得到的纯度分别达到98.0%。