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专利号: 2019110718656
申请人: 杭州师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2023-08-24
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种石斛的全二维液相分离方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)将石斛原料粉碎,过三号筛,得石斛粉末;

(2)将石斛粉末采用基质固相分散提取法进行提取,得石斛提取液;

(3)将石斛提取液通过二维超高效液相色谱与质谱联用进样分析表征分离效果。

2.根据权利要求1所述的一种石斛的全二维液相分离方法,其特征在于,步骤(2)中,所述基质固相分散提取法包括以下步骤:将石斛粉末与分散剂混合研磨后,将所得混合物填充入固相萃取小柱,经洗脱、离心,取上层清液得石斛提取液。

3.根据权利要求2所述的一种石斛的全二维液相分离方法,其特征在于,所述分散剂为C18分散剂;所述C18分散剂与石斛粉末的质量比为(1~2):1。

4.根据权利要求2所述的一种石斛的全二维液相分离方法,其特征在于,洗脱工艺中所用洗脱剂为纯甲醇。

5.根据权利要求1所述的一种石斛的全二维液相分离方法,其特征在于,步骤(3)中,所述二维超高效液相色谱包括一维液相和二维液相;所述一维液相的色谱柱的流速控制在

0.05~0.11mL/min;所述二维液相的色谱柱的流速控制在1.5~3.0mL/min。

6.根据权利要求5所述的一种石斛的全二维液相分离方法,其特征在于,步骤(3)中,所述一维液相的色谱条件为:色谱柱:SB C18(2.1×100mm,1.8μm),柱温:50℃,进样量:2.0μL,检测波长:270nm,采样频率:40Hz,流速:0.07mL/min,流动相:A:0.05%甲酸水,B:甲醇;梯度洗脱:0min,20%B;

3min,40%B;22min,50%B;25min,90%B;29min,100%B;35min,100%B;40min,100%B。

7.根据权利要求5所述的一种石斛的全二维液相分离方法,其特征在于,步骤(3)中,所述二维液相的色谱条件为:色谱柱:Poroshell 120Bonus(3.0×50mm,1.8μm),柱温:50℃,进样量:2.0μL,检测波长270nm,采样频率,80Hz,流动相:A:0.05%甲酸水,B:乙腈;在全二维模式下,梯度停止时间为0.2min,梯度周期为0.35min,二维流速为2.0mL/min。

8.根据权利要求5所述的一种石斛的全二维液相分离方法,其特征在于,步骤(3)中,所述二维液相的梯度模式为:初始梯度:0min,15%B;0.2min,50%B;在0min时梯度:0-5min,

15%B;5-40min,15-50%B;在0.2min时梯度:0-5min,50%B;5-40min,50-75%B。

9.根据权利要求1-8任一所述的一种石斛的全二维液相分离方法,其特征在于,步骤(1)中,所述石斛原料包括铁皮石斛,金钗石斛和鼓槌石斛。

10.根据权利要求9所述的一种石斛的全二维液相分离方法,其特征在于,所述石斛中有效成分包括香草酸、丁香酸、芹菜素-6,8-二-c-β-d-葡萄糖苷、对羟基肉桂酸、阿魏酸、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、柚皮苷、柚皮素、木犀草素、毛兰素、石斛酚、石斛碱和滨篙内酯。