1.一种金枪鱼鱼肉ACE抑制肽咀嚼片的制备方法,其特征在于,包括以下制备步骤:
1)使用酶解法从金枪鱼鱼肉中提取得到ACE抑制肽;所述ACE抑制肽的肽段氨基酸序列为Ser‑Pro、Val‑Asp‑Arg‑Tyr‑Phe、Met‑Trp‑Asn、Met‑Glu‑Lys‑Ser、Met‑Lys‑Lys‑Ser或Leu‑Pro‑Arg‑Ser;
金枪鱼肉 ACE 抑制肽的制备方法,包括以下步骤:
a)将金枪鱼白肉解冻、烘干除去水份,随后在金枪鱼中加入乙酸乙酯,浸没脱脂,旋转蒸发后,烘干、粉碎备用;
b)将预处理后的白肉粉末加入蒸馏水,调节 pH 值至 8.5‑10.5 后,加入 1‑3wt%碱性蛋白酶,在45‑65℃下酶解3h,得到酶解液;
c) 将酶解液在 100℃水浴下加热 10min 进行灭酶处理,随后在 4000r 下离心
20min,取上清液,得灭酶酶解液,随后冷冻干燥,得到多肽粉,测 ACE 抑制活性;
d)使用 3.5 KDa 的超滤膜对金枪鱼白肉酶解液进行超滤分级,将产物组分冷冻干燥后得到酶解物粉;随后将酶解物粉与超纯水配成浓度为 50 mg/mL 的溶液,并于 4 ℃下以
12000 r/min离心 10 min,去除不溶性杂质, 用已活化葡聚糖凝胶 Sephadex G‑25 过滤层析,冷冻干燥后,配成浓度为 100 mg/mL 的溶液,经 0.45μ m 微孔滤膜过滤,以乙腈‑水‑三氟乙酸(TFA)为洗脱液进行梯度洗脱,流速为 2ml/min,经高效液相色谱柱 Zorbax SB‑C18 纯化分析,氨基酸测序、合成得到金枪鱼白肉 ACE 抑制肽;
或者,金枪鱼肉 ACE 抑制肽的制备方法,包括以下步骤:
a)将金枪鱼红肉解冻、烘干除去水份,随后在金枪鱼中加入乙酸乙酯,浸没脱脂,旋转蒸发后,烘干、粉碎备用;
b)将预处理后的红肉粉末加入蒸馏水,调节 pH 值至 6‑8 后,加入 1‑3wt%碱性蛋白酶,在45‑65℃下酶解 4h,得到酶解液;
c)将酶解液在 100℃水浴下加热 10min 进行灭酶处理,随后在 4000r 下离心
20min,取上清液,得灭酶酶解液,随后冷冻干燥,得到多肽粉,测 ACE 抑制活性;
d)使用 3.5 KDa 的超滤膜对金枪鱼红肉酶解液进行超滤分级,将产物组分冷冻干燥后得到酶解物粉;随后将酶解物粉与超纯水配成浓度为 50 mg/mL 的溶液,并于 4 ℃下以
12000 r/min离心 10 min,去除不溶性杂质,用已活化葡聚糖凝胶 Sephadex G‑25 过滤层析,冷冻干燥后,配成浓度为 100 mg/mL 的溶液,经 0.45μ m 微孔滤膜过滤,以乙腈‑水‑三氟乙酸(TFA)为洗脱液进行梯度洗脱,流速为 2ml/min,经高效液相色谱柱 Zorbax SB‑C18 纯化分析,氨基酸测序、合成得到金枪鱼红肉 ACE 抑制肽;
2)原辅料预处理:将ACE抑制肽、制备辅料以及食品添加剂研磨粉碎过筛;
3)将ACE抑制肽、制备辅料以及食品添加剂混合制备得到软材料;
4)将软材料干燥后进行筛分,制成干燥粒料;
5)将干燥粒料进行压片、杀菌、包装,制得金枪鱼鱼肉ACE抑制肽咀嚼片。
2.根据权利要求1所述的一种金枪鱼鱼肉ACE抑制肽咀嚼片的制备方法,其特征在于,步骤2)中所述辅料各组分的质量份数为:脱脂奶粉5‑10份,淀粉25‑30份,山梨醇10‑15份。
3.根据权利要求1所述的一种金枪鱼鱼肉ACE抑制肽咀嚼片的制备方法,其特征在于,步骤2)中所述食品添加剂各组分的质量份数为:矫味剂40‑50份,酸味剂2‑5份,所述矫味剂为麦芽糖醇、山梨糖醇、蔗糖、木糖醇中的一种或几种,所述酸味剂为柠檬酸、苹果酸或乳酸中的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的一种金枪鱼鱼肉ACE抑制肽咀嚼片的制备方法,其特征在于,步骤3)中制备软材料时各组分质量份数为:ACE抑制肽10‑15份,辅料35‑50份,食品添加剂
40‑50份。
5.根据权利要求1所述的一种金枪鱼鱼肉ACE抑制肽咀嚼片的制备方法,其特征在于,步骤3)中制备软材料时ACE抑制肽、制备辅料以及食品添加剂混合后,喷洒润湿剂,所述润湿剂为40‑60wt%的乙醇水溶液控制软材料的润湿性,使软材料达到捏之成团,触之即散的状态。
6.根据权利要求1所述的一种金枪鱼鱼肉ACE抑制肽咀嚼片的制备方法,其特征在于,步骤4)干燥时将软材料置于50‑70℃下干燥1‑2h,至水分含量为2‑4wt%。
7.根据权利要求1所述的一种金枪鱼鱼肉ACE抑制肽咀嚼片的制备方法,其特征在于,步骤5)压片时在干燥粒料加入1‑1.5wt%硬脂酸镁,放入压片机中,在0.3‑0.4MPa下进行压片。